亲和素作为合成肽疫苗载体的初步研究.pdf

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1、2014年第31卷第9期亲和素作为合成肽疫苗载体的初步研究吴美丽，蒋文明，刘朔，侯广宇，庄青叶，王楷宸，李金平，于建敏。，王素春。，黄保续。，陈继明，单虎(1．青岛农业大学，山东青岛266109；2．中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛266032)摘要：将人工合成带有生物素标记的禽流感病毒两条多肽与亲和素结合，形成亲和素．生物素．合成肽连接物，然后免疫小鼠。采用酶联免疫吸附试验进行抗体检测。检测结果发现这些连接物能够诱导抗亲和素抗体的产生，但不能诱导抗合成肽抗体的产生，检测结果表明亲和素不能借助其与生物素的特异性结合，成为合成肽疫苗的理想载体。关键词：合成

2、肽疫苗；亲和素；生物素；载体；禽流感病毒中图分类号$852．659．5；TQ563．7文献标识码：B文章编号：1005．944X(2014)09．0077-03PreliminarystudyofavidinassyntheticpeptidevaccinecarrierWuMeili，27JiangWenming，LiuShuo，HouGuangyu，ZhuangQingye，WangKaicheng，LiJinping，YuJianmin2，WangSuchun，HuangBaoxu，ChenJiming，ShahHu(I．QingdaoAgricult

3、ureUniversity，Qingdao266109，China；2．ChinaAnimalHealthandEpidemiologyCenter，Qingdao266032，China．)Abstract：Inthisstudy，twopeptides1abeledofavianinfluenzaviruswithbiotinweresynthesized，andmixedwithavidintoformavidin—biotin—peptidecomplexes，andusedtoimmunizemice．Antibodywasdetectedbyen

4、zymelinkedirnmunosorbentassay(ELISA)．Thedetectionresultsshowedthatthesecomplexescouldinduceanti-avidinantibodies，buttheycouldn’tinduceantibodiesagainstthesynthesizedpeptide，suggestingthatavidincannotbeconsideredasallidealcarrierofsyntheticpeptidevaccinethroughitsspecificbindingtobi

5、otin．Keywords：syntheticpeptidevaccine；avidin；biotin；carrier；avianinfluenzavirus现在用于疫病预防的疫苗大多数是对病原体进力强，操作简单，质量易于控制[3】。但是，亲和素行灭活或者减毒而制备的。实际上，这些疫苗诱导能否借助这种特异性结合，成为合成肽疫苗的载体，产生的保护性免疫反应通常仅局限于疫苗中少数氨尚不明确。本研究人工合成带有生物素标记的禽流基酸或多肽_1]。人工合成这些诱导保护性免疫反应感病毒两条保守的多肽，将这两条多肽与亲和素结的多肽，将它们与某些大分子(即载体)共价偶联合，

6、形成亲和素．生物素．合成肽连接物，然后分后，能刺激机体产生保护性免疫反应。这类疫苗被别免疫小鼠，用酶联免疫吸附试验检测抗体，检验称为合成肽疫苗。目前，口蹄疫合成肽疫苗己应用这些连接物是否能够诱导产生针对合成肽的抗体。于我国口蹄疫的防控[2】。1材料与方法合成肽疫苗具有生产成本小、使用安全、副作1．1多肽合成用小等优点[1】，但这类疫苗在载体选择和偶联等方由上海生工生物工程公司合成禽流感病毒面，仍然存在诸多困难和疑惑。目前，合成肽疫苗基因中两个保守的多肽，各20mg。其序列分别的载体都依靠化学共价偶联，不仅操作上较为困难，为RIENLNKKMEDGFLDVwT

7、YNAELLVLMEN．也难以控制偶联的质量。亲和素(Avidin，本文缩ERTLDFHDSNVKNLYDKVRLQLRDNA和写为A、，)与合成肽上标记的生物素(Biotin，本MSLLTEVETPTRNEwECRCSDSSD。这两条合成文缩写为B)能特异性结合，且这种结合反应结合肽分别针对禽流感病毒HA和M基因上一段保守通讯作者：陈继明的区域；以前研究提示它们能够作为B细胞表位，囝