人67kd层粘连蛋白受体在毕赤酵母中的表达及活性分析

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1、!"卷#期生物工程学报&’()!"*’)#!$$%年%月!"#$%&%’()*$+,(-.#(/%0"$(,(12+,(-!$$%!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!人!"#$层粘连蛋白受体在毕赤酵母中的表达及活性分析%&’()**+,-.-/012+3+240-.54*+*,6789.-!"#$:.9+-+-;)1)’2,(+-!"#$"%&%’()*"’8!88"连继勤，戴旭芳，甘立霞，何凤田8，4:RT,NH>ED!，U:*Q1NT1>88"QR:*+1NS1E>E3VOH/EDN@1>

2、E8第三军医大学生物化学与分子生物学教研室，重庆#$$$"M!重庆师范大学特殊教育学院，重庆#$$$#%83%4+*/5%$/(-.#(0"%5#&/*2+$67(,%0),+*.#(,(12，8"#*67#,#/+*27%6#0+,9$#:%*&#/2，!"($1;#$1#$$$"M，!"#$+!<4%0#+,=6)0+/#($!(,,%1%(-!"($1;#$1>(*5+,9$#:%*&#/2，!"($1;#$1#$$$#%，!"#$+摘要为实现人9%C4层粘连蛋白受体（V,5>E9%C4Q>51E1E./0/;<’7，9%Q.）蛋白的分泌表达，采用4*:重组技术将9%Q.04

3、*:片段插入分泌型酵母表达载体;WRIKX中，构建了相应的重组表达质粒;WRIKXN9%Q.并在UG88J毕赤酵母菌株中表达，每升培养基经亲和层析可纯化目的蛋白8!)J95D。纯化的目标蛋白能够与肺癌:J#K细胞竞争性结合其配体分子Q*N8，具有相应的生物学活性，从而为深入研究人9%Q.的结构与功能奠定了基础。关键词9%Q.，毕赤酵母，蛋白质表达中图分类号S%M文献标识码:文章编号8$$$N"$9（8!$$%）$#N$9$!N$J0<*2(.12@’0>77-’,<E9%C4(>51E1E7/0/;<’7（9%Q.），7/0’

4、561E>EA513;WRIKXN9%Q.B>A0’EA<7,0AA/Y;7/AA/31E?#0"#+4+&/(*#&>FE’(，>E3>6’,<8!)J95D/(/0<7’;?’7/A1A;,71<-9%Q.0’,(36/’6<>1E/3>F<1’E’F8Q0,(<,7/,A1ED>FF1E1<-0?7’5><’D7>;?0’(,5E)@$:#/*(0

5、’5;/<1<12/61E31ED>AA>-A?’B/3<<>7D/<;7’A>E/Y0/((/E<61’(’D10>(>0<121<-)@?/A,00/AAF,(/Y;7/AA1’E’F9%Q.?>A;(>0/3>A’(13F’,E3><1’EF’770?’EA<7,0<,7/>E3F,E0<1’EA’F9%Q.)=)4>,(/*9%Q.，?#0"#+4+&/(*#&，;7’

6、等用消减杂交技术对恶性黑色素瘤及良性结果。癌细胞表面的9%C4层粘连蛋白受体（9%C4黑痣组织标本中基因表达的差异进行检测，发现［8］(>51E1E7/0/;<’7，9%Q.）在这一过程中表达上调，且通9%Q.基因的表达与肿瘤的进程有关。到!$$J年过与其配体的作用而介导并参与了这一过程的发为止已有超过8!$$$例对来自不同器官、不同类型生。9%Q.是层粘连蛋白（Q>51E1E，Q*）的一种高亲的肿瘤用免疫组化方法证实了9%Q.在浸润、转移［!］和性非整合素受体，8KM"年首次报道该受体的表达甚至肿瘤生长中的作用。因此，弄清9%Q.与其配./0/12/3：4/0/56/78，!$$

7、9；:00/;70?8!，!$$%)@?1AB’7CB>AA,;;’7D7>E<1’E>(*><,7>(G01/E0/AH’,E3><1’E’FI?1E（>*’)"$#$$JJK）)"I’77/A;’E31ED>,1(：?/F/ED<1>E99P<’5)0’5国家自然科学基金项目（*’)"$#$$JJK）资助。连继勤等：人!"5&层粘连蛋白受体在毕赤酵母中的表达及活性