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《4个肾上腺脑白质营养不良家系的基因诊断》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国优生与遗传杂志2007年第15卷第10期·39·4个肾上腺脑白质营养不良家系的基因诊断王志红,黄梁浒,兰风华(南京军区福州总医院全军医学检验中心,福州350025)摘要:目的对4个肾上腺脑白质营养不良家系进行基因突变分析。方法应用RT-PCR技术,对4个患者的AB2CD1基因编码区,分4个片段进行扩增并对PCR产物直接测序。应用变性高效液相色谱技术、PCR-限制性酶切等方法分析相应的基因组DNA,进一步确证ABCD1的突变位点。结果在3名肾上腺脑白质营养不良患者的ABCD1基因上,存在2个不同的碱基置换(807G>A和2113T>C)和1个碱基插入(1126insGCCATCG),分
2、别造成2个错义突变(A141T和L576P)和1个移码突变(fsI246);在患儿1母亲的一个ABCD1等位基因上存在1801-1802位碱基缺失,造成移码突变(fsE471),另一个等位基因未发现突变。结论在中国人ALD患者中发现2个新的ABCD1基因突变(fsI246、L576P)。不同家系具有不同的突变位点,且突变类型和表型之间无特殊的相关性。关键词:肾上腺脑白质营养不良;ABCD1基因;基因突变;变性高效液相色谱中图分类号:R39413文献标识码:A文章编号:1006-9534(2007)10-0039-04GenediagnosisoffourChinesepedigreesw
3、ithX-linkedadrenoleukodystrophy.WANGZhi-hong,HUANGLiang-hu,LANFeng-hua.(PLACenterforLaboratoryMedicine,FuzhouGeneralHospital,Fuzhou350025,China)Abstract:Objective:ToidentifythemutationalgenotypeoffourChinesefamilieswithX-linkedadrenoleukodystrophy(X-ALD).Methods:ThecodingregionofABCD1geneoffourpa
4、tientswasamplifiedin4segmentsbyPCRafterreversetranscriptionu2singRT-PCRtechnology.ThePCRproductswerepurifiedanddirectlysequenced.Toconfirmthemutations,thegenomicDNAwasanalyzedbyPCR-restrictivedigestionordenaturinghighperformanceliquidchromatography.Results:Twobasesubstitutions(807G>Aand2113T>C),o
5、nebasedeletion(1801delAG)andonebaseinsertion(1126insGCCATCG)wereidentifiedinfourX-ALDpedigrees,whichresultedintwomissensemutations(A141TandL576P)andtwoframeshiftmutations(fsE471andfsI246).Con2clusion:TwonovelABCD1mutations,whichwerefsI246andL576P,weredetectedinChineseX-ALDpatients.Thereweredif2fe
6、rentABCD1genemutationsindifferentpedigreesandnoobviouscorrelationbetweengenotypeandphenotypewasfound.Keywords:Adrenoleukodystrophy;ABCD1gene;Genemutation;Denaturinghighperformanceliquidchromatography肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy,ALD)是序参照文献[3],分4个片段(ALD1、ALD2、ALD3、ALD4)最常见的过氧化物酶体病,呈X-连锁遗传。根据ALD的
7、发对ABCD1基因编码区进行扩增。从先证者的外周血入手,病年龄及其主要受累部位,本病可分为儿童脑型(childhood提取全血总RNA并反转录成长链cDNA,以cDNA为模板,cerebralALD,CCALD)、青少年脑型、成人脑型、肾上腺脊髓扩增4个片段。在总反应体积50μl中含:cDNA2μl、引物各神经病型(adrenomyeloneuropathy,AMN)、单纯Addison病型、30pmol、dNTP0.2mmol/L
