碘化钠和il_1_对人甲状腺上皮细胞trail表达的影响_黄颖泓

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1、福建医科大学学报２０１１Ｏｃｔｏｂｅｒ，Ｖｏｌ４５Ｎｏ５ＪＦｕｊｉａｎＭｅｄＵｎｉｖ３３５碘化钠和ＩＬ－１β对人甲状腺上皮细胞ＴＲＡＩＬ表达的影响黄颖泓１，杨立勇２，严孙杰２，张声３摘要：目的研究不同浓度碘化钠（ＮａＩ）和白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）对体外培养的原代人甲状腺上皮细胞（ＴＥＣ）肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（ＴＲＡＩＬ）的表达及凋亡的影响，探讨自身免疫性甲状腺疾病（ＡＩＴＤ）的可能发病机制。方法收集正常、Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）和桥本甲状腺炎（ＨＴ）患者甲状腺组织进行原代细胞培养，以不同浓度ＮａＩ和ＩＬ－１β刺激单层培养的ＴＥＣ，免疫细胞化学方法检测ＴＲＡ

2、ＩＬ表达和分布情况，流式细胞术检测干预后细胞ＴＲＡＩＬ阳性表达率及细胞凋亡率的变化。结果（１）ＧＤ组和ＨＴ组ＴＥＣ的ＴＲＡＩＬ阳性百分率与正常组比较显著增加（Ｐ＜０．０５）。（２）正常组及ＧＤ组在１０ｍｇ／ＬＮａＩ干预下与１ｍｇ／Ｌ浓度组比较，ＴＲＡＩＬ阳性率明显升高（Ｐ＜０．０５）；ＨＴ组在１００ｍｇ／ＬＮａＩ干预下与１ｍｇ／ＬＮａＩ浓度组比较，ＴＲＡＩＬ表达明显增加（Ｐ＜０．０１）。（３）ＨＴ组的ＴＥＣ凋亡率高于正常组和ＧＤ组（Ｐ＜０．０１）。（４）高浓度的ＩＬ－１β对ＴＲＡＩＬ表达有上调作用。结论ＡＩＴＤ患者ＴＥＣ的ＴＲＡＩＬ表达增强，且高碘及ＩＬ－１β可上调Ｔ

3、ＲＡＩＬ表达强度，使凋亡增加，进而可能影响其功能及病理生理改变。关键词：碘化钠；白细胞介素１β；甲状腺；ＴＮＦ相关凋亡诱导配体；细胞凋亡；甲状腺炎，自身免疫性中图分类号：Ｒ３２９．２４；Ｒ５８１．０２；Ｒ３４１；Ｒ９１６．３文献标识码：Ａ文章编号：１６７２－４１９４（２０１１）０５－０３３５－０５自身免疫性甲状腺疾病（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｔｈｙｒｏｉｄ发病机制中的作用和地位。ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＩＴＤ）是人类最常见的的器官特异性自身１材料与方法免疫性疾病，以Ｇｒａｖｅｓ病（Ｇｒａｖｅｓ’ｄｉｓｅａｓｅ，ＧＤ）和桥本甲状腺炎（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ，

4、ＨＴ）为代１．１材料正常组甲状腺组织来自笔者医院外科表。据统计，ＡＩＴＤ引起的甲状腺功能减退在女性手术的１１例良性甲状腺腺瘤瘤旁组织，即腺瘤侵及和男性中的发病率分别是３５０／１０００００／年和范围以外的甲状腺组织，男性４例，女性７例，年龄８０／１０００００／年，甲状腺功能亢进在女性和男性中的（３６±７．６）岁（２６～５３岁）；ＧＤ甲状腺组织（ＧＤ组）［１］发病率分别是８０／１０００００／年和８／１０００００／年。来自５例女性Ｇｒａｖｅｓ病手术标本，年龄（３７±４．２）岁近年来，随着基础研究的不断进展，有学者提出甲（３２～４２岁）；ＨＴ甲状腺组织（ＨＴ组）来自８例状腺上

5、皮细胞（Ｔｈｙｒｏｉｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ，ＴＥＣ）凋亡与ＨＴ手术标本，男性２例，女性６例，年龄（３６±９．３）ＡＩＴＤ的发病有一定关系，并认为细胞死亡受体的岁（２２～５３岁）。诊断均经病理切片证实。体外培激活及调节细胞凋亡的因子参与ＡＩＴＤ的发病过养的细胞部分用于免疫细胞化学检测，部分用于体［２－５］程。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（ＴＮＦ外干预后流式检测。ｒｅｌａｔｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ，ＴＲＡＩＬ，Ａｐｏ－２Ｌ）１．２方法是新近发现的介导细胞凋亡的信号分子，在机体的１．２．１原代培养甲状腺组织用无钙、镁的免疫调节和肿瘤细胞凋亡

6、以及维护机体组织细胞［６］Ｈａｎｋｓ液反复漂洗，剪切，去除包膜、血细胞及结缔稳态方面起重要的作用。有研究证实，ＡＩＴＤ患组织；剪成１ｍｍ×１ｍｍ×１ｍｍ左右的碎块，移入者甲状腺局部白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）水平显著增［７］装有０．２５％胰蛋白酶及０．０５％Ⅱ型胶原酶消化液高。此外，碘作为ＡＩＴＤ发病的重要环境因子，其的小瓶，在３７℃细胞培养箱中消化９０～１２０ｍｉｎ，作用环节和机制亦未阐明。本研究通过观察ＴＥＣ适时终止消化；离心弃上清制成细胞悬液，经２００目形态学的改变及ＴＲＡＩＬ表达情况，分析碘及ＩＬ－１β不锈钢筛过滤后，离心去上清。细胞营养液重悬沉对ＴＥＣ表面

7、ＴＲＡＩＬ表达的影响以及细胞凋亡变积的细胞，调整细胞密度为５×１０５５，接种于化，探讨碘及ＩＬ－１β在甲状腺自身稳态调节和ＡＩＴＤ～１０×１０培养瓶中，置３７℃、体积分数为０．０５的ＣＯ２细胞培收稿日期：２０１１－０４－１３养箱中静置培养；２４ｈ后换液，去除未贴壁的细胞。作者单位：１．福建医科大学附属第一医院重症医学科，福州［８－９］３５０００５；以后根据细胞生长情况，３～５ｄ全量换液１次。２．福建医科大学附属第一医院内分泌科，福建医科大学代谢病研究室，福州３５０００５；１．２．２ＮａＩ的干预实验待细胞长成单层，换用无３．福建医科大学附属第一医院病理