资源描述：
《6种乳酸菌降解胆固醇的体外试验》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第26卷第6期河南科技大学学报(自然科学版)Vol.26No.62005年12月JournalofHenanUniversityofScienceandTechnology(NaturalScience)Dec.2005文章编号:1672-6871(2005)06-0085-046种乳酸菌降解胆固醇的体外试验112刘丽莉,董铁有,杨协立(1.河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;2.三门峡双洋商贸有限公司,河南三门峡472000)摘要:分析了6种安全的乳酸菌菌种在不同条件下接种
2、于体外高胆固醇的MRS-CHOL培养基中降解胆固醇的情况,以及培养液的pH值与胆固醇降解率的关系。结果表明,所用的6个菌种均可有效降解胆固醇,依次为Lp菌(28.088%)、3#菌(25.059%)、4#菌(24.922%)、Lf菌(24.554%)、Ld菌(22.248%)和5#菌(18.513%),降解率随接种量的增加和培养时间的延长而增加,除Lf菌外,其它菌株都随胆固醇浓度的变化而出现先升后降的趋势,培养液的pH值与胆固醇的降解率呈负相关性,且都不显著。关键词:微生物;乳酸菌;胆固醇;降解
3、率中图分类号:TS201.3文献标识码:A0前言近年来,国内外微生态学家发现微生物菌群中的乳酸菌、双歧杆菌以及肠球菌等与胆固醇的降解有[1~3]一定的关系,大量的体内外研究也证实了某些乳酸菌具有降低血清胆固醇含量的功效。为此,人们[4]对于乳酸菌降低胆固醇的机理进行了广泛的研究。对于降解机理相关报道有3种看法:(1)Gilliland[5]等提出并证明了乳酸菌对于胆固醇具有同化作用。(2)乳酸菌在胆盐的作用下与胆固醇产生共沉淀作用。(3)现在人们大多倾向于同化作用和共沉淀作用的共同结果。但对于
4、乳酸菌菌种体外胆固醇的降解能力的研究报道却很少。本文将不同乳酸菌菌种接种于体外含高胆固醇的MRS-CHOL培养基中,研究各菌种在不同情况下对胆固醇降解情况,并同时研究pH值与胆固醇降解率的相关性,从而为开发低胆固醇的发酵食品提供理论依据。1试验材料与方法1.1试验材料乳酸菌:来源于湖南农业大学食品科技学院微生物实验室,从发酵酸辣椒、莴笋、菠萝中筛选出的3种乳酸菌分别简称为3#、4#、5#;来源于中国科学院微生物研究所菌种保藏中心(CGMCC)由农科院畜牧所提供的干酪乳杆菌(Lactobaci
5、llus.casei)、植物乳杆菌(Lactobacillus.plantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillus.fermentium)分别简称Ld、Lp和Lf,其藏号依次为1.29,1.555,1.1880。固体培养基:乳酸菌采用MRS固体培养基,成分配方按照文献[6]方法。MRS液体培养基:不加琼脂,其它成分同固体培养基。以上均采用121灭菌20~30min。MRSO-CHOL选择培养基:在MRS培养基中,分别加入不同浓度的胆固醇胶束溶解液,使浓度分别为0.5、1.0、1.5、
6、20mgmL。胆固醇:AR级,中国医药上海化学试剂公司;胆盐:AR级,美国Sigma公司;蔗糖酯:生化试剂,长沙食品添加剂公司;FeNH4(SO4)12H2O:AR级,上海化学试剂公司。1.2主要仪器设备净化工作台(SW-CJ-IB标准型,苏州安泰空气有限公司);高压蒸汽灭菌锅(XYQ.SG46.28型,辽宁化学仪器厂);离心机(LD5-2A型,北京医用离心机厂);分光光度计(722型,上海第三分析仪器厂);精密pH计(pHS-3C上海实验仪器厂);移液枪(GILSON公司)。基金项目:
7、国家十五科技攻关资助项目(2001BA533C)作者简介:刘丽莉(1974-)女,河南洛阳人,讲师.收稿日期:2005-04-3086河南科技大学学报(自然科学版)2005年1.3试验方法[7](1)乳酸菌菌落总数的测定。采用稀释平板计数法,吸取100L样品,无菌,pH=6.8的PBS缓冲溶液梯度(按110,1100,11000)稀释,吸取合适稀释度的溶液100L于无菌培养皿,倒入50左右的灭菌MRS琼脂培养基。立即混匀,凝却后倒置厌氧培养,38培养
8、36~72h,观察菌落生长情况,并计数。活菌数计数公式:cfumL=平板菌落数稀释倍数10。[8](2)高胆固醇培养液MRSO-CHOL的制备。选择应用广泛的高胆固醇MRSO-CHOL培养液作为体外菌株降胆固醇能力的培养液。1000mL液体培养基中含1mgmL胆固醇胶束溶液的制备:准确称量胆固醇0.1g放入小烧杯中加入0.2g胆盐、0.1g蔗糖酯、1mLTWEEN-80搅拌均匀再移取5mL的冰乙酸加热溶解把溶解液用超声波处理15min后快速加入到配制好的液体培养基中,边加入边搅拌
