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1、口腔生物医学2014年6月(第5卷第2期)OralBiomedicine,Vo1.5,No.2,Jun.2014·75·[文章编号]1674—8603(2014)02—0075—03中间普氏菌培养上清对牙龈成纤维细胞RANKL/OPG表达的影响杨迷芳,杨天,王子露,王琰玲,吴友衣(南京医科大学口腔医学研究所,江苏南京210029)[摘要]目的:探讨中间普氏菌培养上清对牙龈成纤维细胞核因子一KB受体活化因子配体(receptoractivatorfornuc]earfactor—KBligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotege
2、rin,OPG)表达的影响。方法:将系列浓度的中间普氏菌培养上清作用于牙龈成纤维细胞,显微镜下观察细胞的变化。实时定量RTPCR法和Westernblot法分别检测RANKL、OPGmRNA及蛋白水平的表达,并计算RANKL/OPG的比值。结果:牙龈成纤维细胞的数量随中间普氏菌培养上清浓度的增加而减少,50g/mL时,显微镜下没有活细胞存在。在mRNA水平上和蛋白水平上,RANKL/OPG的比值在12.5g/mL处理组均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.o1)。结论:中间普氏菌培养上清可诱导人牙龈成纤维细胞表达RANKL和OPG,破坏R
3、ANKL/OPG比例的平衡,影响破骨细胞分化的细胞因子微环境,在破骨细胞分化和牙周炎骨吸收中起着一定的调节作用。[关键词]中间普氏菌;牙龈成纤维细胞;核因子一-(B受体活化因子配体;骨保护素[中图分类号]R780.2[文献标识码]A[doi]10.3969/j.issn.1674—8603.2014.02.005EfectofPrevotellaintermediasupernatantontheexpressionofRANKLandOPGinhumangingivalfibroblastsYANGMifang,YANGTian,WANGZ
4、ilu,WANGYanling,UYounong.(InstituteofStomatology,NangMedicalUniversity,Nanjing210029,China)Correspondingauthor:YANGMng,Email:yangmng@qq.com,Tel:0086—25—86862025[Abstract]Objective:ToevaluatetheeffectsofPrevoteUaintermediasupernatantontheexpressionofreceptoractivatorofNF—KBl
5、igand(RANKL)andosteoprotegerin(OPG)inhumangingivalfibroblasts(HGFs).Methods:TheHGFsweretreatedwithgradientPrevotellaintermediasupernatant.HGFswereobservedunderthemicroscope.Thereal—timeRT-PCRandWesternblotanalysiswereusedfortestingtheexpressionofRANKLandOPG,andtheRANKL/OPGr
6、atiowascalculated.Results:Thenumberofcellsdecreasedwithincreaseofthesupernatantconcentration.At50Ixg/mL,nocellsurvivalcouldbeobservedunderthemicroscope.TheratioofRANKL/OPGwasincreasedinthecellstreatedwith12.5g/mLofPrevotellaintermediasupernatant(P<0.01).Conclusions:Prevo-te
7、llaintermediasupernatantcou]ddisruptthehomeostasisofRANKL/OPG,destroythemicroenvironmentofosteoclastdiferentiation.Prevotellaintermediasupernatantmayplayaregulatoryroleinosteoclastdifferentiationandboneresorptioninperiodontitis.[Keywords]Prevotellaintermedia;Gingivalfibrobl
8、asts;ReceptoractivatorofNF—KBligand;Osteoprotegerin牙龈成纤维细胞(humangingivalfibroblast
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