低氧微环境下自噬对顺铂处理的肺腺癌A549细胞增殖活性的影响-论文.pdf

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1、·676·￡L西医—2013年8月第48卷第8期jianiMedica1Jouma1．August2013．Vo148．No8·实验研究·低氧微环境下自噬对顺铂处理的肺腺癌A549细胞增殖活性的影响郭宇玲，徐丽瑶，李丽芳，蔡阿桥，李勇(南昌夫学第‘附属医院肿瘤科，南昌330006)摘要：目的观察在低氧环境下自噬对人肺腺癌A549细胞化疗敏感性的影响方法常规低氧培养人肺腺癌A549细胞，分为低氧对照组及低氧+3一甲基腺嘌呤(3-MA)组，分别采用透视电子显微镜观察不同时间点细胞自噬体的变化，West．ernbl(，t检测自噬标记蛋白微管相关

2、蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达，分析LC3II／LC3I比值变化。随后每组再给予顺铂fDDP1处理后，采用M¨比色法检测细胞增殖活性。结果低氧状态下．A549细胞自噬体形成增加，LC3II／LC3I蛋白比值表达升高．加入自噬抑制剂3-MA后，自噬体数量、I,Cll／LCI比值较单纯低氧组均下降。予顺铂处理后，低氧+3一MA组细胞增殖活性较低氧下降。结论在低氧环境中，A549细胞保护性自噬增强，抑制自噬可增强A549细胞对顺铂化疗的敏感性关键词：自噬；低氧；肺癌；3一甲基腺嘌呤；顺铂中图分类号：R73—354文献标识码：B文章编号：1006

3、—2238(2013)08—0676—02DOI：10．3969~．issn．1006—2238．2013．08．009TheefectofautophagyontheproliferationactivityofhumanadenocarcinomaA549celltreatedwithDDPinhypoxiaconditionGUOYuling，XULiyao，L1Lifang，eta1．DepartmentofOncology，FirstAfiliatedHospitdofNanchangUniversity．Nan—chang33

4、0006，ChincLAbstract：ObjectiveToobservetheeffectofautophagyonthechemosensitivityofhumanadenocarcinomaA549cellinhy—poxiacondition．MethodsCultureA549cellsinhypoxiacondition．thendividedthemintotwogroups：hypoxiagroupand3一MAplushypoxiagroup，electronmicroscopywasusedtodetectauto

5、phagosmelevelsatdiffererenttimepoints，theexpressionofLC3wasexaminedbywesternblot．TheproliferationactivityofA549cellsafterDDPtreatmentwasdeterminedbyMTTassay．ResultsTheformationofautophagosomeandtheratioofLC3II／LC31wereincreasedinhypoxiacondition，aftertreatmentwithautophag

6、yinhibitor3MA，thequantityofautophagosomeandtherationofLC3II／LC31weredecreased．Theproliferationactivityof3-MAplushypoxiagroupwashigherthanhypoxiagroupaftertreatmentwithDDP．ConclusionThelevelofprotectiveautophagyofA549cellwasincreasedinhypoxiacondition，inhibitautophagycanim

7、provethechemosensitivityofA549celltoDDP．Keywords：Autophagy；Hypoxia；Lungcancer；3-methyladenine；Cisplatin低氧是恶性肿瘤重要病理生理特征之一．大海生物工程技术服务有限公司)：三气培养箱约90％的实体肿瘤存在低氧现象。大量研究表明，(SANYO公司)；蛋白电泳仪、电转仪(Bio—Rad公低氧可导致肿瘤细胞埘化疗药物的抵抗【1'21．但具司)；透射电子显微镜(日本JEM一2100)。体机制目前尚不明确已有研究报道低氧可诱导1．2细胞培养及实验分

8、组人肺腺癌A549细胞购肿瘤细胞白噬发生I3_．但自噬是否参与对低氧环境于中科院E海细胞库用含10％胎牛血清的RP—卜肺腺癌A549细胞化疗敏感性的影响，目前尚未MI一1640培养基，于37o