岩黄连总碱单用及联用顺铂对人肺腺癌a549细胞增殖的影响及机制的研究

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1、独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得(注：如没有其他需要挂别声明的，本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：。岳l；皇签字日期沙甲年岁月，／日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被

2、查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)矗．学位论文作者签名：启鲣导师签字：9冬捌～签字日期：at甲年j月，1日签字日期沙砷年j月，1日目录岩黄连总碱对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及机制的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1ABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7日IJ吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯／1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．1实验细胞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．2主要实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．3主要实验仪器⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．101．4实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．111．4．1试剂配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．4．2细胞培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．4．3MTT法检测不同浓度岩黄连总碱作用不同时间对A549细胞的影响及岩黄连总碱IC50值检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．121．4．4MTT法检测单用岩黄连总碱、顺铂及岩黄连总碱联用顺铂作用48h后对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．131．4

5、．5Hoechest荧光染色法检测单用岩黄连总碱、顺铂及岩黄连总碱联用顺铂作用48h后A549腺癌细胞凋亡的情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．141．4．6RT-PCR检测单用岩黄连总碱、顺铂及岩黄连总碱联用顺铂作用48h后A549腺癌细胞中caspase．3mRNA和survivinmRNA表达的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．141．4．7Western．blot检测单用岩黄连总碱、顺铂及岩黄连总碱联用顺铂作用48h后A549腺癌细胞中caspase．3和survivin蛋白表达的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．161．5统计学方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．182结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯193讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯254结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35综述岩黄连抗肿瘤作用及其他药理作用作用研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．39岩黄连总碱对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及机制的研究中文摘要目的：探讨岩黄连总碱对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其可

7、能机制。方法：在体外培养人肺腺癌A549细胞株至对数生长期，用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测单用岩黄连总碱在不同浓度(O．1g／L、0．05g／L、0．01g／L、0．005g／L)分别作用24h、48h、72h后，对人肺腺癌A549细胞的生长抑制情况，用MTT法检测阴性对照、单用岩黄连总碱O．03g／L、顺铂0．002g／L以及岩黄连总碱联用顺铂作用48h后，对人肺腺癌A549细胞的生长抑制情况。Hoechst染色观察阴性对照、单用岩黄连总碱0．03g／L、顺铂0．002g／L以及岩黄连联用顺铂作用48h后，对人肺腺癌A549细胞的生长

8、抑制情况。RT-PCR法检测阴性对照、岩黄连0．03g／L、顺铂O．002g／L以及岩黄连总碱和顺铂联合用药作用于人肺腺癌A549细胞48h后，对人肺腺癌A549细