一株放线菌的分离鉴定及其代谢产物研究-论文.pdf

《一株放线菌的分离鉴定及其代谢产物研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、酿酒科技2014年第9期(总第243期)·LIQUOR—MAKINGSCIENCE＆TECHNOLOGY2014No．9(To1．243)DOI：10．13746~．njkj．2014．0174一株放线菌的分离鉴定及其代谢产物研究杨帆，陈良强，林琳，王和玉，王莉(贵州茅台酒股份有限公司技术中心，贵州仁怀564500)摘要：利用高氏平板从酱香型白酒生产环境土壤中筛选分离得到1株放线茵NSO1，利用形态学、16SrRNA序列同源性鉴定目的菌株为链霉菌属(Streptomycessp．o分别采用液态与固态培养基培养目的茵种，通过顸

2、空固相微萃取技术进行萃取，再利用气相色谱质谱联用仪分析代谢产物，结果发现该茵代谢大量的萜烯类物质。代谢产物中的倍半萜烯类物质：2一甲基异莰醇、土臭素具有土臭味和霉味，该类物质可能与酱香型白酒酿造过程中出现霉味有关。关键词：链霉菌；代谢产物；萜烯类物质；霉味；白酒；微生物中图分类号：TS261．1；Q93—3；TS262．3；TS261．7；TS61．4文献标识码：A文章编号：1001—9286(2014)09—0042—03Isolation＆IdentificationofanActinomycetesStrainandA

3、nalysis0fItsMetabolitesYANGFan，CHENLiangqiang，LINLin，WANGHeyuandWANGLi(TechnicalCenterofMaotaiCo．Ltd．，Renhuai，Guizhou564500，China)Abstract：AnactinomycetesstrainNS01wasisolatedfromthesoilintheproductionenvironmentofMaotaibyuseofGause’Scultureplate．Anditwasidentified

4、asStreptomycessp．by16SrRNAgenesequenceanalysisandmorphologicalanalysis．AfterthecultureofstrainNS01byliquidculturemediumandbysolidculturemediumrespectively，itsmetaboliteswereextractedbyHS·SPMEandthenanalyzedbyGC—MS．Itwasfoundthatitsmetabolitescontainedalargenumberof

5、terpenes．2-methylisobomeolandgeosmininthesesquiterpenesinthemetabolitesmightberelatedtothemusty-odorofbaseliquor．Keywords：Streptomycessp．；metabolites；terpenoids；musty-odor；Baijiu(1iquor)；microbes中国传统白酒酿造过程实质上是微生物的发酵过药品与试剂：面粉、小麦、高粱、高氏一号培养基。2一程。传统白酒是开放式的固态发酵，众多酿造微生物都

6、参甲基异莰醇、土臭素标样(购买于Sigma公司)。PCR所用与其中。酿酒微生物的种类、数量、分布及其消长变化等试剂：购自大连宝生物有限公司(TaKaRa)。对发酵途径及最终产物的生成有着重大的影响，进而影仪器：高速冷冻离心机、Agilent7890A一5975C气相响着白酒的质量与风格。目前。对传统白酒酿造环境中的色谱质谱联用仪(GC—MS)、PCR仪、电泳仪、凝胶成像细菌、霉菌、酵母菌的相关研究开展较多【卜，而关于放线仪，BIO—RAD等。菌的报道很少，主要研究集中在浓香型白酒的大曲和窖1．2实验方法泥的放线菌上【。游玲[

7、7j等从浓香型白酒中分离得到41．2．1微生物的分离筛选株链霉菌，并对其代谢产物进行了研究，认为这些链霉菌称取25g样品于250mL无菌生理盐水中，振荡混的代谢产物对浓香型白酒质量起着积极的作用。匀，梯度稀释，选择合适的梯度涂布于高氏一号分离培养本研究拟对酱香型白酒生产环境土壤中的放线菌进基上，以30℃培养4～5d。选择菌落分布较好的平板．先行分离、鉴定，并对其液态与固态挥发性代谢产物进行研对其菌落形态进行观察，初步找出放线菌菌落．再划线分究，探索其代谢产物对酱香型白酒酿造的影响。从而更加离。为了确保得到纯菌株，反复划线分离

8、2～3次。深入了解放线菌在酱香型白酒酿造中的作用与地位。1．2．2菌株分子鉴定菌株基因组的提取见参考文献【m】。使用引物314Fl材料与方法(5’一CCTACGGGAGGCAGCAG一3，)和926R(5’一CCGT—1．1材料、试剂及仪器CAATTCCTTTGAGTTT一3，)进行PCR