不同诱导条件下家蝇（Musca domestica）三龄幼虫免疫相关基因的表达研究-论文.pdf

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1、生物技术通报·研究报告·8loTECHNoLOGYBULLETIN2O14年第6期不同诱导条件下家蝇(Muscadomestica)三龄幼虫免疫相关基因的表达研究修江帆魏川川陈明明吴建伟(贵阳医学院，贵阳550004)摘要：旨在研究在不同诱导条件下家蝇三龄幼虫先天性免疫基因的表达情况。采用冷刺激、热刺激及革兰氏阴性茵、革兰氏阳性菌和真菌注射诱导12h后提取家蝇三龄幼虫总RNA。根据GenBank公布的家蝇磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因、攻击素(Attacin)、天蚕素(Cecropin)、防御素(Defensin)、双翅肽(D

2、iptericin)、溶茵酶(Lysozyme)、热休克蛋白(Heatshockprotein，HSP)及家蝇抗真菌肽(MAF1)基因序列进行RT．PCR反应，以GAPDH基因为内参照，分析在不同诱导条件下家蝇三龄幼虫先天性免疫基因的表达情况。结果显示，不同条件诱导下，家蝇免疫相关基因表达显现较大差异，微生物诱导比物理刺激诱导后家蝇免疫相关基因表达水平高；真茵、阳性菌诱导后家蝇免疫相关基因表达量最高，阴性菌次之；冷刺激诱导最低。微生物及物理刺激均能激活家蝇的免疫系统，在不同条件刺激下，家蝇幼虫机体免疫应激反应不同。关键词：家蝇诱导

3、先天性免疫基因表达’v’：xoressi‘onAnalysisoOftImmuneGuenesatDvi‘t’l’erentIlndOuctionConditionsofThirdInstarLarvaeofMuscadomesticaXiuJiangfanWeiChuanchuanChenMingmingWuJianwei(GuiyangMedicalUniversity，Guiyang550004)Abstract：Westudiedontheinnateimmunegeneexpressionatdifferentinduc

4、tionconditionsofthirdinstarlarvaeofMuscadomestica．Wechosethecold，heatstimulationandgramnegativebacteria，grampositivebacteriaandfungiinducedthethirdinstarlarvae，12hoursafterthetotalRNAwasextractedfromthirdinstarlarvae．WedesignedtheprimersaccordingtothepublishedGenBankg

5、lyceraldehydephosphatedehydrogenase(GAPDH)，Attacin，Ceeropin，Defensin，Diptericin，Lysozyme，heatshockprotein(HSP)andMuscaantifungalpeptide(MAF-1)genesequencesofhousefly．WewereusingtheGAPDHasreferencegene．Analysedthegeneexpressionindifferentinducingconditionsofthirdinstar

6、la~aeofhouseflythroughRT-PCRreaction．Resultsshowedthatindifferentinducingconditions，thegenesrelatedinnateimmunityexpressionshowedlargedifferences．Microbialstimulationshowedthehigherlevelsofgeneexpressionthanphysicalstimulation．Thegeneexpressioninductionoffungiandposit

7、ivebacteriawasthehighest，thecoldstimulationinducedthelowest．Theinnateimmunesystemofthehouseflylarvaecouldactivatebybothmicrobialandphysicalstimulation．Indifferentconditionsofstimulation，thebody’simmuneresponsetodifferentstress．Keywords：MuscadomesticaInductionInnateimm

8、unityGeneexpression家蝇是一种世界性广泛分布的昆虫，隶属于昆具有T、B淋巴系统，因此不具有高等动物的获得虫纲双翅目环裂亚目蝇科蝇属。家蝇从幼虫到成虫性免疫系统，然而，昆虫之所以能够对病原体的侵均喜好生活在病原物富集的环境中，其体表