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《Sorcin的表达影响人胶质瘤细胞对顺铂的敏感性-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2013。29(7):1202.1206[文章编号]1000-4718(2013)07-1202-05Sorcin的表达影响人胶质瘤细胞对顺铂的敏感性木刘宁,孙连坤,杨晓春,马丽伟,苏静△(吉林大学白求恩医学院病理生理学系,吉林长春130021)[摘要]目的:研究可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorein)在人胶质瘤细胞对顺铂敏感性中的作用。方法:构建pSilencer3.1.H1-sorcinsiRNA表达质粒;质粒转染人胶质瘤U251细胞;RT-PCR和Wes
2、ternblotting法检测sorcinmRNA和蛋白表达的变化;MTY法检测U251细胞的生存率;Westernblotting检测耐药相关蛋白的表达变化。结果:经酶切和测序鉴定,成功构建pSilencerr3.1-HI-sorcinsiRNA表达载体;将该表达载体转染U251细胞,RT—PCR和Westernblotting结果显示soreinmRNA和蛋白表达量降低(P<0.05);MTr结果显示,抑制sorein表达可增强U251细胞对顺铂的敏感性(P<0.05);同时发现抑制U251细胞的sorcin表达能降低耐药相关蛋白P
3、-糖蛋白(P.sp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的蛋白水平(P<0.05)。结论:抑制sorein表达增强U251细胞对顺铂的敏感性,其作用机制可能与降低耐药相关蛋白P-gP和MRP1的表达有关,提示sorein可能与胶质瘤细胞顺铂耐药有关。[关键词]神经胶质瘤;顺铂;耐药性;可溶性耐药相关钙结合蛋白[中图分类号]R739.41[文献标志码]Adoi:10.3969/j.issn.1000—4718.2013.07.010Efectofsorcinexpressiononsensitivityofhumangliomacellsto
4、cisplatinUUNing,SUNLian—kun,YANGXiao-chun,MALi-wei,SUJing(DepartmentofPathophysiology,NormanBethuneCollegeofMedicine,朋inUniversity,Changchun130021,China.E-mail:sujing@flu.edu.cn)[ABSTRACT]AIM:Toinvestigatetheefectofsoreinexpressiononthesensitivityofhumangliomacellstocisp
5、l—atin.METHODS:pSilencerTM31-H1-sorcinsiRNArecombinantplasmidwasconstructed,andtransfectedintohumansli—.omaU251ceNs.RT-PCRandWesternblottingwereusedtoanalyzetheexpressionofsorcinatmRNAandproteinlevelsaf-tertransfection.TheviabilityofU251cellsWasmeasuredbyMTYassay.Theprot
6、einexpressionofP-glycoprotein(P—gP)andmultidrugresistance·associatedprotein1(MRP1)inU251cellsWasdetectedbyWesternblotting.RESULTS:TheplasmidpSileneerTM3.1一Hl-sorcinsiRNAwassuccessfullyconstructed,andWasconfirmedbyrestrictionenzymedigestionandsequenceanalysis.Theexpressio
7、nofsoreinatmRNAandproteinlevelsWassignificantlydecreasedaftersorcinsiRNAWastransfectedintoU251cells(P<0.05).InhibitionofsoreinexpressionsignificantlydecreasedtheviabilityofU251cellstreatedwithcispMtin(P<0.05),andtheexpressionofP—gPandMRP1proteinsWasalsoinhibited(P<0.05).
8、CONCLUSION:InhibitionofsorcinexpressionincreasesthesensitivityofU251cellstocisplatinbydecreasingtheex-p
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