DDP的顺铂耐药及对mTOR表达的影响-论文.pdf

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1、第19卷第9期中国实验方剂学杂志Vo1．19．NO．92013年5月ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulaeMay，2013补中益气汤含药血清逆转A549／DDP的顺铂耐药及对mTOR表达的影响史妍婷，井欢，王莹，易佳丽，刘春英(辽宁中医药大学，沈阳110032)[摘要]目的：研究补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549／DDP)顺铂耐药的逆转作用及对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mTOR

2、)表达的影响。方法：动物随机分组，制备补中益气汤高、中、低剂量血清(给药剂量分别为11．34，5．67，2．83g·kg～·d。。)，将A549，A549／DDP细胞体外分为顺铂(DDP)组，空白血清+DDP组，含药血清高剂量+DDP组，含药血清中剂量+DDP组，含药血清低剂量+DDP组，细胞对照组，经过15％各组血清联合DDP不同浓度(10，20，40，80，100，200Ixmol·L)作用48h，采用MTT法检测补中益气汤不同浓度含药血清对A549／DDP顺铂耐药的逆转作用；采用免疫荧光，免疫细胞化学，We

3、stern—blot方法检测mTOR的表达。结果：与DDP组比较，补中益气汤不同浓度含药血清作用于A549／DDP后Ic和耐药倍数均有显著降低(P<0．05)，以补中益气汤中剂量组(等临床剂量组)作用最为显著(P<0．01)，A549／DDP中mTOR的染色吸光度及荧光强度均明显减弱(P<0．O1)，蛋白表达水平明显降低(P<0．01)。结论：补中益气汤能增强A549／DDP对顺铂的敏感性，并能通过降低细胞生存通路中mTOR的表达而有效逆转肺腺癌细胞的顺铂耐药。[关键词]补中益气汤；肿瘤；肺腺癌顺铂耐药细胞株；哺

4、乳动物雷帕霉素靶蛋白[中图分类号]R285．5[文献标识码]A[文章编号]1005-9903(2013)09—0215-05[doi]10．11653／sy02013090215RatSerumContainingofBuzhongYiqiDecoctionReverseChemotherapeuticResistanceinA549／DDPCellsbyDown·regulatingExpressionLevelsofmTORSHIYah—ting，JllNGHuan，WANGYing，YIJia—li，LIU

5、Chun—ying(LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032，China)[Abstract]Objective：ToidentifytheeffectofratserumcontainingdifferentconcentrationsofBuzhongYiqidecoction(BZYQT)onreversethechemotherapeuticresistanceinA549／DDPcellsandontheexpressio

6、nofmTOR．Method：Animalswererandomizedtopreparedtheratserumcontainingvarieddoes1evelsofBZYQT(doesfor11．34，5．67，2．83g·kg‘。·d)，theA549，A549／DDPwereequallydividedintosixgroupsinrandom：theDDPgroup，BZYQTlowdoes+DDPgroup，BZYQTmiddledoes+DDPgroup，BZYQThighdoes+DDPgrou

7、p．NS+DDPgroupandthecellcontrolgroup．Followedby15％serumofeverygroupandthedifferentconcentrationsofDDP(10，20，40，80，100，200Ixmol·L)for48h，assayedbyMTTtodetecttheratserumcontainingofBZYQTreversethechemotherapeuticresistanceinA549／DDP．TheexpressionofmTORincellswer

8、eevaluatedbyindirectimmunofluorescence。immunocytochemistrytechniqueandWestern．blot．Result：ThemedianinhibitoryconcentrationIC50andresistantmultipleofA549／DDPissignificantreductionbytheseru