IEX-1基因转染对人卵巢癌细胞增殖活性及顺铂敏感性的影响-论文.pdf

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1、14IEX一1基因转染对人卵巢癌细胞增殖活性及顺铂敏感性的影响韩丽萍张晓雪①张毅②耿丽娜李萌萌郑州大学第一附属医院妇产科(河南郑州)450052中国图书分类号R737．31文献标识码A文章编号1001-4411(2o13)14-2297-03；doi：10．7620／zgfybj．j．issn．1001—4411．2013．28．40【摘要】目的：探讨即刻早期反应基因一1(immediateearlyresponsegeneX一1，IEX一1)转染人卵巢癌细胞SKOV3后，对顺铂药物敏感性的影响。方法：提取并鉴定重组质粒pE

2、GFP—N1一IEX一1，采用脂质体介导将重组质粒转染到人卵巢癌细胞SKOV3，RT—PCR检测转染前后IEX一1mRNA和蛋白的表达情况，采用四甲基偶氮唑蓝(MTF)法检测转染后卵巢癌细胞SKOV3增殖情况以及对顺铂敏感性的变化。结果：成功转染IEX一1基因后可检测到IEX一1mRNA的高表达；转染组细胞的增殖速度增快(P<0．05)，但对顺铂的敏感性明显增强(P<0．05)。结论：IEX一1可增强卵巢癌细胞的体外增殖能力，并增强卵巢癌细胞体外对顺铂化疗的敏感性，为肿瘤的有效干预和治疗提供新的靶点。【关键词】即刻早期反应基

3、因一1SKOV3基因重组顺铂转染EfectsofIEX——1genetransfectiononproliferationandsensitivitytocisplatininhu-manovariancarcinomacelllineHANLi—P，ZHANGXiao—Xue，ZHANGYi，eta1．DepartmentofObstetricsandGynecology，theFirstAffiliatedttos—pital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052，Henan，China

4、[Abstract]Objective：ToexploretherecombinedplasmidpEGFP—N1一IEX一1transfectionanditsinfluenceonthesensitivitytocisplatinonhumanovariancelllineSKOV3．Methods：TherecombinedplasmidpEGFP—N1一IEX一1waspurifiedandverifiedbyPCR．TheexpressionofIEX一1mRNAwasexaminedbyRT—PCR．MTI"wa

5、susedtodetecttheefectsofIEX一1genetransfeetiononprolif-erationandsensitivitytocisplatinofovariancancercelllineSKOV3．Results：TherewaslowexpressionofIEX一1mRNAinSKOV3cellsandhighexpressionofIEX一1mRNAwasdetectedaftertransfection．Aftertransfection．theM，ITI1resultsshowedt

6、hatcellproliferationratewasmuchfaster(P<0．05)andmoresensitivitytocisplatincomp~edwiththenormalgroup(P<0．05)．Conclusion：IEX一1canpro—motetheproliferationabilityandenhancethesensitivitytocisplatinofovariancancercelllineSKOV3invitro，whichprovidesnewtargetsforeffectivei

7、nterventionandtreatmentofovariancancer．[Keywords]ImmediateearlyresponsegeneX一1；SKOV3；Geneticrecombination；Cisplatin；Transfection卵巢癌治疗失败最主要的原因之一是卵巢癌细胞1．1材料重组质粒pEGFP—N1一IEX—l由美国化疗敏感性降低，进而产生耐药。基因治疗在肿瘤领哈佛大学医学院威尔曼光子医学中心MeiX．．Wu副教域的成功应用为卵巢癌的治疗提供了新的思路。即刻授惠赠；SKOV3购自美国ATCC细

8、胞库；RevertAid早期反应基因一1(immediateearlyresponsegeneX一FristStrandcDNA购自加拿大Formentas公司；脂质体1，IEX一1)属即刻早期基因家族，能在多种刺激因2000转染试剂盒购自美国Invi~ogen生物技术公司。子的诱导下快速