辣椒‘9704A’雄性不育特异基因hsf的克隆及表达分析-论文.pdf

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1、湖南农业大学学报(自然科学版)2014年6月第40卷第3期JournalofHunanAgriculturalUniversity(NaturalSciences)，Jun．2014，40(3)：257-261DOI：10．13331／j．cnki．jhau．2014．03．007投稿网址：http：／／www．hunau．net／qks辣椒‘9704A'雄性不育特异基因hsf的克隆及表达分析胡双发，彭彦，赵燕，刘峰，张学文f1．湖南农业大学生物科学技术学院，湖南长沙410128；2．湖南省农业科学院蔬菜研究所，湖南长沙410125)摘要：对辣

2、椒细胞质雄性不育系‘9704A'和其同核保持系‘9704B’早期花蕾转录组的Solexa测序结果进行分析，发现1个差异性表达基因，其在不育系中的表达比在保持系中的表达高10倍，该基因与番茄、葡萄、拟南芥中的，基因同源性分别为87％、73％和70％，推测该基因为辣椒的基因。根据该基因序列设计引物，从辣椒‘9704A'中克隆该基因的全长及核心eDNA序列，克隆到的厂全长与核心序列与转录组测序获得的序列一致，进一步分析表明，该基因属于mf基因家族成员。用定量PCR分析mf基因在‘9704A'7~1‘9704B’2种辣椒的根、茎、叶和晚期花蕾中的表达情

3、况，结果表明，该基因在不育系叶组织的表达量为其在保持系叶组织表达量的l3．7倍，在不育系晚期花蕾中的表达量也为其在保持系晚期花蕾的3倍，而在2种辣椒系的茎中的表达量都很低，在2种辣椒系的根中的表达量均较高。关键词：辣椒；雄性不育；热激转录因子；定量分析中图分类号：$641．3；Q781文献标志~i-5：A文章编号：1007—1032(2014)03—0257—05CloningandexpressionanalysisofaCMSspecifichsfinCapsicumannuumL．‘9704A’HUShuang—fa，PENGYan，ZH

4、AOYah，LIUFeng，ZHANGXue．wen(1．CollegeofBioscienceandBiotechnology，HunanAgriculturalUniversity，Changsha410128，China；2．InstituteofVegetables，HunanAcademyofAgriculturalSciences，Changsha410125，China)Abstract：TranscriptomSolexasequencingwasconductedonpepperearlyflowerbudsoftheCMSl

5、ine‘9704A’anditscorrespondencehomonuclearmaintainerline‘9704B’previously．Agenethatexpressed10timeshigherinpeppercytoplasmmalesterile(CMS、line‘9704A’thanitisinthemaintainerline‘9704B’wasidentified．Genehomologyanalysisoftheclonedhsfgeneshowedthatthegeneshares87％homologywiththe

6、inSolanumlycopersicum，73％inVit&viniferaand70％inArabidopsisthaliana．AccordingtothegenesequencewedesignedtheprimersandclonedthecoresequenceandhsfcDNAinpepper‘9704A’．SequenceanalysisshowedthattheclonedhsfcDNAwasconsistentwithtranscriptomSolexasequencing．Geneanalysisshowedthatth

7、egeneisoneoftheplantsmfgenefamilymembers．Thereal-timefluorescencequantitativeRT—PCRprimersweredesignedandtheRT-PCRofthegenewascarriedoutwiththecomparedtissuesin‘9704A’and‘9704B’，usingactinasreferencegene．Theresultshowedthatthehsfgeneexpressionin‘9704A’leafis13timeshigherthan

8、itisinthemaintainerlineandin‘9704A’laterflowerbudis3timeshigher．Thegeneexpr