高效液相色谱法同时测定复方祛斑乳膏中熊果苷和根皮素的含量-论文.pdf

《高效液相色谱法同时测定复方祛斑乳膏中熊果苷和根皮素的含量-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、·276·中国中医药科技2014年5月第21卷第3期May2014Vo1．21No．3_．．-I--_同Cj效液相色谱法同时测定复方祛斑乳膏中目术熊果苷和根皮素的含里曲彩红麦海燕谢阳施文平(中山大学附属第三医院·广州510630)摘要目的：建立复方祛斑乳膏中熊果苷和根皮素的含量测定方法，完善该制剂的质量控制标准。方法：采用WELCHROMC18柱(粒度5p,m，4．6mm×250mm)，流动相：甲醇一水(50：50)；柱温：28oC；流速：0．8mL·min～；检测波长286nm。结果：熊果苷和根皮素的线性范围均为：0．01—0．20mg·mLI1(n=7)；熊果苷和根皮素平均回收率分别为99

2、．36％和99．66％，RSD分别为0．68％和0．86％(n=9)；熊果苷和根皮素在乳膏中标示量的百分含量平均值分另4为99．73％和99．01％。结论：该含量测定方法精密度高，重现性好，可作为复方祛斑乳剂的质量控制标准及含熊果苷或根皮素制剂的质控标准。关键词复方祛斑乳膏熊果苷根皮素含量测定熊果苷(arbutin)，又名熊果甙，是一种源于熊果属的叶供试品溶液：精密称取复方祛斑乳膏1．000g(约相当于子细胞里的皮肤脱色成份；根皮素(phloretin)是存在于苹熊果苷及根皮素各5rag)，置100mL锥形瓶中，加甲醇适量，果、梨等水果及多种蔬菜汁液中的天然活性物质；二者均能冰浴下超声(功率1

3、20W，频率35kHz)提取15分钟，取出，先有效地抑制皮肤中的酪氨酸酶(Tyrosinase)活性，阻断黑色用滤纸过滤，再用微孑L滤膜过滤(0．45p．m)，合并续滤液，放素的形成，从而对各种皮肤色斑有淡化作用，祛除色斑和雀置至室温，用容量瓶定容至50mL，制得供试品溶液。斑”，而且熊果苷所具有的的抗氧化、抗炎作用-6]及根阴性样品溶液：按处方制备成不含熊果苷及根皮素的空皮素的抗氧化、透皮吸收促进作用J，决定目前二者是新白基质乳膏，精密称取与供试品溶液制备等量的空白基质，型皮肤美白剂和抗氧化剂的理想组合。而且根皮素还能激同上操作，制得阴性样品溶液。活蜂窝蛋白激酶，对细胞无序增生有疗效，可用于

4、皮肤癌及2．2色谱条件色谱柱：WELCHROMC18柱(5la,m，4．6ram其它肿瘤的治疗¨。鉴于此，本研究为验证二者在临床×250mm)；流动相：甲醇一水(50：50，v／v)；柱温：28℃；流上治疗紫外线诱导的黑色素斑的功效，将其制备成乳膏供临速：0．8mL·rain一；检测波长286nm；进样量10L。在此条床试验使用，而测定该乳膏(复方祛斑乳膏)中熊果苷和根件下，测得熊果苷+根皮素混合对照品溶液，色谱图见图1。皮素的含量，是评价该制剂质量的一个重要指标。现将本研其中熊果苷的保留时间为2．66分钟，根皮素的保留时间约究中复方祛斑乳膏中熊果苷和根皮素的含量测定方法报道为16．9分钟。如

5、下。2．3线性关系考察精密量取2．1法中熊果苷和根皮素混1材料合对照品储备液0．5⋯124⋯6810mL分别置10mL量瓶Agilentl100高效液相色谱仪；92SM一201A型电子分析中，加甲醇定容，进样10tzL，测定并记录熊果苷和根皮素的天平：瑞士PRECISA，精度0．01mg；AS3120型超声波发生吸收峰面积，以浓度为横坐标，峰面积吸收值的千分之一为器：AutoScience公司。熊果苷对照品：上海源叶生物科技有纵坐标，进行线性回归，得熊果苷的线性回归方程为A=限公司，编号：YY90140，纯度I>98％；根皮素对照品：杭州天4．0899C+0．0061，r=0．9999(n=7

6、)；根皮素的线性回归方草技术有限公司，批号：APR200709051，纯度≥98％；复方祛程为A=46，5116C+0．0604，r=0．9994(n=7)；二者在0．01斑乳膏(含熊果苷0．5％、根皮素0．5％，s／g)及空白乳膏(不～0．20rag·mL浓度范围内线性关系良好。含熊果苷和含根皮素)：自制，批号分别为120816、120822、2．4方法学考察120905、120915、120929。所用原料均为药用规格，试剂均为2．4．1稳定性试验复方祛斑乳膏(批号：12081．6)按2．1色谱纯。项下方法超声提取、过滤定容后于0、2、4、8、16、24小时进2方法与结果样，依法测定，结果

7、熊果苷和根皮素的峰面积的RSD分别为2．1溶液配制对照品贮备液：精密称取熊果苷及根皮素1．88％及1．36％。结果表明样品溶液在24小时内稳定。对照品各10．00rag，置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，2．4．2精密度试验精密量取浓度为0．04mg·mL～2．1摇匀，制成含熊果苷和根皮素均为0．20rag·mL的对照品项下对照品混合溶液10txL，连续进样5次，记录熊果苷和根贮备液。皮素的色