DDP细胞MRP表达影响的比较-论文.pdf

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1、第20卷第8期中国实验方剂学杂志Vo1．20．NO．82014年4月ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulaeApr．，2014补中益气汤含药血清同siRNA对A549／DDP细胞MRP表达影响的比较井欢，唐莹，于丹。，刘春英(辽宁中医药大学，沈阳110032)[摘要]目的：观察补中益气汤含药血清对人肺腺癌耐顺铂药细胞株(A549／DDP)多药耐药相关蛋白(multidrugresistance．associatedprotein，MRP)表达的影响，并将结果同小分子干扰RNA(smalli

2、nterferingRNA，siRNA)技术特异性沉默MRP基因相比较。方法：采用血清药理学方法制备含药血清，随机对照法将18只SD大鼠分为空白对照组(给生理盐水10mL·kg)，补中益气汤高、低剂量组(11．34，2．84g·kg～，10mL·kg)，每日ig给药1次，连续3d后制备补中益气汤药含药血清，使用siRNA转染A549／DDP细胞，取处于对数生长期细胞于6孔板中，每孑L加40L质粒(0．1g·L)，24h后，利用RT—PCR(reversetranscription—polymerasechainreaction，RT—PCR)技术检测MRP

3、mRNA的表达和蛋白质印迹法(Westernblot)技术检测MRP蛋白表达。实验分组为：空白对照组、补中益气汤含药血清低、高剂量处理组和MRPsiRNA处理组。结果：与空白对照组相比，补中益气汤含药血清低、高剂量处理组和MRPsiRNA处理组的MRPmRNA及蛋白表达均减少，具有统计学意义(P<0．05)。结论：补中益气汤含药血清能降低A549／DDP细胞上的MRP蛋白表达，且同特异性沉默MRP基因后效果类似。[关键词]小分子干扰RNA技术；补中益气汤；人肺腺癌耐顺铂药细胞；多药耐药相关蛋白[中图分类号]R285．5【文献标识码]A[文章编号]1005—

4、9903(2014)08-0150—04[doi]10．13422／j．cnki．syfix．2014080150ToCompareEffectofBuzhongYiqiDecoctionSerumwithsiRNAonMRPExpressionofA549／DDPCellsJINGHuan，TANGYing，YUDan，LIUChun—ying(LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032，China)[收稿日期]20131114(023)[基金项目]国家自然科学基金项目(81

5、072743)；辽宁省教育厅项目(2010355)[第一作者]井欢，博士，副教授，从事中药免疫调节，中药抗肿瘤相关工作，Tel：024—31207060，E—mai1：2974907780@qq．corn[通讯作者]刘春英，博士，教授，从事中药抗肿瘤作用及机制相关工作，Tel：024-31207061，E—mail：chunying99@163．com[9]SwaminathanK，KumarSM，ClemensDL，eta1．increasesinoxidativestress[J]．JHepatol，2009，50InhibitionofCY172El

6、leadstodecreasedadvanced(6)：1236．glycatedendproductformationinhighglucosetreated[13]SidB，VerraxJ，CalderonPB．RoleofAMPKactivationADHandCYP2E1over—expressingVL一17Acells[J]．inoxidativecelldamage：Implicationsforalcohol—BiochimBiophysActa，2013，1830(1O)：4407．inducedliverdisease[J]．Bioch

7、emPharmacol，2013，86[1O]周宜强．帕朱胶囊临床应用举隅[J]．世界中医药，(2)：200．2008，3(5)：294．[14]ShearnCT，SmathersRL，JiangH，eta1．Increased周东方，魏峰，周俊英．腺苷酸激活蛋白激酶在大鼠dietaryfatcontributestodysregulationoftheLKB1／乙醇性肝病中的表达减少[J]．基础医学与临床，AMPKpathwayandincreaseddamageinamousemodel2012，32(10)：1154．ofearly—stageeth

8、anol—mediatedsteatosis[J]．JNutr[1