紫甘薯膳食纤维的提取及对自由基的清除作用.pdf

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1、第32卷第2期沈阳师范大学学报(自然科学版)Vo1．32No．22014年4月Journal0_，’ShenyangNormalUniversity(NaturalScienceEdition)Apr．2014文章编号：1673—5862(2014)02—0206—04紫甘薯膳食纤维的提取及对自由基的清除作用李润国，高岩，单秀峰(1．沈阳师范大学粮食学院，沈阳110034；2．辽宁水利职业学院，沈阳110122)摘要：以紫甘薯为材料，设计4因素3水平的正交实验，酶法提取膳食纤维。结果表明紫甘薯粉中膳食纤维提取的最佳工

2、艺参数为0．7的混合酶(其中a一淀粉酶：糖化酶为6：1)，酶解温度7O℃，处理时间80min，0．6蛋白酶。以体外实验研究不同质量浓度(2O～140mg／mL)的膳食纤维鲜样对1，1二苯基一2一苦昧酰基自由基(DPPH)、超氧阴离子自由基(O·)、羟自由基(·OH)的清除效果。结果表明紫薯膳食纤维对DPPHO·、·OH都有明显的清除效果，在2O～140rag／mE的膳食纤维的浓度范嗣内，其清除自由基的效果随着膳食纤维的浓度增大而增强，但当浓度增加到一定程度后，对DPPH、超氧阴离子自由基的清除能力趋于平缓，对·OH的

3、清除效果呈直线上升；其清除能力顺序为：DPPH自由基>超氧阴离子自由基>羟自由基。关键词：紫甘薯；膳食纤维；自由基；清除中图分类号：TS202．1文献标志码：Ad0j：10．3969／i．issn．1673—5862．2014．02．0160引言膳食纤维指不能被人体消化但对人体健康有某种特殊功能作用的多糖类和木质素的物质总称Ⅲ。它可以促进人体内对糖类、脂类的代谢，限制人体对胆固醇的吸收、降低心血管疾病的发生机率、缓解便秘。因此把膳食纤维称为“第七营养素”[2]。自由基衰老理论认为使人体衰老及某些慢性病发生的主要原因是

4、自由基对人体组织或器官的破坏作用，当体内的自由基过多时，细胞和组织就会受到攻击，使其结构和功能受到破坏，从而加速人体的衰老(或)诱发疾病的产生嘲。膳食纤维以独特的方式可清除某些外源性有害物质【4]。对某些自由基的清除效果也较明显引。本实验选择紫甘薯为材料，采用多酶酶解法提取膳食纤维l6]，并研究了紫甘薯膳食纤维对DPPH、07·、·OH等3种自由基的清除作用。1材料与方法1．1材料与试剂紫甘薯：购自沈阳市某农贸市场；a一淀粉酶(2000U／g)、糖化酶(1×lOU／mL)：购自江苏锐阳生物科技公司；木瓜蛋白酶(6×l

5、OU／g)：由国药集团化学试剂公司提供；DPPH：Sigma公司。1．2仪器与设备手持式粉碎机、干燥箱，恒温水浴锅，752S紫外可见分光光度计，离心机。1．3实验方法1．3．1紫甘薯膳食纤维的提取先将紫甘薯切成薄片，经干燥后，粉碎成细粉，过40目筛。每组实验称取5g此干粉，分别加入蒸馏水45mL，先用混合酶(即a一淀粉酶粉，糖化酶)在一定的温度下酶解80min，漂洗至中性；再加入蒸馏水25mL，加入木瓜蛋白酶在60℃下处理60min，漂洗至中性，将所得物置于60~70℃下烘干至恒收稿日期：2014—01—20。基金项

6、目：辽宁省科技厅自然科学基金资助项目(2Ol102197)。作者简介：李润国(1965一)，男，辽宁凤城人，沈阳师范大学教授。第2期李润国，等：紫甘薯膳食纤维的提取及对自由基的清除作用207重，计算膳食纤维的得率_7呻]。以膳食纤维的得率为考察指标，以混合酶比例(一淀粉酶粉：糖化酶，m／m)、混合酶用量、混合酶酶解温度及蛋白酶用量为影响因素，通过L。(3)正交实验方法找出提取紫甘薯粉膳食纤维的最佳工艺参数。其因素水平分别为混合酶比例(4：1、5：l、6：1)；混合酶用量(O．5、0．6、0．7)；酶解温度(6OoC、

7、70℃、80℃)；蛋白酶用量(0．4、0．5、0．6)。1．3．2测定不同体系中薯粉膳食纤维粉清除自由基的能力以正交实验中最佳条件提取膳食纤维，将膳食纤维分别配制成浓度为20、40、6o、8o、100、120、140mg／mL的7种样品，分别进行清除自由基的体外实验l6。1．3．2．1DPPH清除能力利用比色法对清除效果进行测定[。取适量的DPPH，用95的乙醇制成1×10mol／mL溶液，分别取5mL该溶液置于7只试管中，分别向试管中加入0．5mL的不同浓度的(2O、40、60、80、100、120、140mg／m

8、L)膳食纤维溶液，在25℃下恒温3Orain，4000r／rain离心10rain，取上清液，在51nm波长下分别测定吸光值为A1；用5mL的95乙醇替代上述5mL的DPPH溶液，重复上述操作，分别测定吸光值为A1；再测定DPPH溶液(5mL)与蒸馏水(O．5mL)的混合液的吸光度为A3。1．3．2．2超氧阴离子自由基体系采用邻苯三酚自氧化法：