韭菜总黄酮的提取及对羟自由基的清除作用研究论文

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1、韭菜总黄酮的提取及对羟自由基的清除作用研究论文.freelg/ml，回收率为100%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程.freelChinesechivesetryinetheflavanoneofChinesechives.TheeffectofextractsfromChinesechivesonhydroxylradicalsethodthecontentofthetotalflavanoneofChinesechivesg/mlandtherateofrecoveryethodstogettheouteandthepurityof

2、theflavanoneishigh.Thismethodisapurelyphysicalprocessandhasnopollution.ItisanidealChinesechiveshavescavengingeffectsonhydroxylradicals.Keyent；Chinesechive；Totalflavanone；Hydroxylradical；Scavenging韭菜Chinesechives又叫长生韭、扁菜等，自古以来就受到国人的喜爱。韭菜因营养丰富，又有温补肝肾、助阳固精作用，故在《中国药典》上有“起阳草”之称。韭菜作为

3、药用，最早见于梁·陶弘景《名医别录》，谓其能“安五脏，除胃中热”［1］。《食疗本草》说它能“利胸膈”。《本草拾遗》说它能“温中，下气，补虚，调和脏腑，令人能食，益阳，止泻白脓，腹冷痛，并煮食之”。明代李时珍在《本草纲目》中写道，韭菜“补肝及命门，治小便频数，遗尿……”等［2］。韭菜味甘、辛，性温；有补肾助阳，温中开胃，散淤血等功效；药理研究发现其具有调节血脂、预防和治疗心血管疾病的作用，在肠内有消毒、灭菌的功能。临床上常用作治跌打损伤、噎膈、反胃、肠炎、吐血、鼻衄、胸痛、阳痿、早泄、遗精、多尿、神经性皮炎等症。现代研究证明，韭菜含有挥发油硫化物、蛋白

4、质、脂肪、糖类、胡萝卜素、维生素B和C、纤维素、钙、磷、铁等［1］。近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道［3，4］，表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响［4］。但超声技术应用于提取韭菜中黄酮类物质的研究尚未见报道。为此，本文报道用超声波乙醇浸提法提取韭菜总黄酮、鉴别及提取物总黄酮对羟自由基的清除作用

5、。1仪器与试剂1.1仪器KQ5200DB型数控超声波清洗器（超声工作频率40KHz、江苏省昆山市超声仪器有限公司）；UV-755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)；SHB-III循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司）。1.2试剂95%乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；乙酸镁AR；甲醇AR；镁粉AR；正丁醇AR；芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；双氧水AR；硫酸亚铁AR；水杨酸AR；新鲜韭菜采自广西百色市。2方法与

6、结果2.1总黄酮成分提取取新鲜韭菜，烘干，粉碎。称取韭菜粉末6g，加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤。滤渣再加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩25ml左右为止，放置250ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。2.2测定方法依据以芦丁为对照品测定韭菜中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。2.3定量实验-总黄酮的含量测定2.3.1波长的选择取样品液适量，在0.30ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸

7、铝显色后，以试剂为空白参比液在420～700nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。2.3.2标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.13mg/ml）0.00，0.05，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白，于510nm处测吸光度。吸光度测定结果见表1。表1紫

8、外可见分光光度计测定吸光度结果（略）2.3.3提取物含量的测定精密吸取样品液0.50ml，置10ml容量瓶，