夏枯草中总黄酮提取工艺的研究.pdf

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1、夏枯草中总黄酮提取工艺的研究李万林f陕西理工学院化学与环境科学学院陕西汉中723000)摘要:目的:研究夏枯草中总黄酮的最佳提取工艺。方法:通过正交试验采用醇提法从夏枯草中提取总黄酮。结果:夏枯草中总黄酮最佳提取方案是:提取时间为50min,乙醇浓度为70%,固液比为1:16。在最佳提取方案下夏枯草中总黄酮的含量为1.2682%。关键词:夏枯草;总黄酮;提取工艺;正交试验引言1实验夏枯草(Prunellavulgaris1为唇形科夏枯草属1.1材料、试剂和仪器多年生草本植物,其性寒、味苦辛,具有清肝明目、1.1.1材料与试剂消肿散结等功效.现代临床

2、多用于治疗甲状腺肿市购夏枯草.于6O℃下烘干.粉碎后过6O目大、淋巴结核、乳腺增生、高血压、肺结核、急性黄筛,备用。芦丁标准品(>98%,上海源叶生物科技有疸性传染性肝炎等疾病黄酮类化合物广泛存在限公司);其余无水乙醇、无水三氯化铝、硝酸铝、于植物体内.无不良反应.同时具有显著的清除人亚硝酸钠、氢氧化钠等均为分析纯。体内自由基、抗老化、抗突变、调血脂、血压等药理1.1.2仪器保健功能,是一类极具开发前景的天然抗氧化剂。722一E型紫外分光光度计(上海精密仪器科学黄酮类化合物是指通过中央三碳链相互连接有限公司)、GR一200型单盘电子分析天平f日本而

3、成的一系列化合物的统称,包括黄酮、黄烷酮、aND)、SHZ一3型水循环真空泵(河南巩义市杜甫仪双黄酮及其甙等化合物黄酮类物质广泛存在于器厂)、DOB20005型电热干燥箱f中国重庆银河试动物牧草饲料、一些中草药及我们日常食用的豆验仪器有限公司)、JJ一2型组织捣碎机(金坛市城西类、某些谷类、水果和蔬菜等植物性食物中。近年,春兰实验仪器厂)等。对其功能研究表明:动物体内、外试验证明,黄酮1.2实验方法类物质具有提高动物的免疫机能,促进动物的繁1.2。1总黄酮的提取工艺流程殖、生长等功能,且具有剂量小、见效快,毒性低等夏枯草粉末乙醇提取提取液过滤离优点

4、。因此.是一种具有广阔开发前景的新型饲料心一上清液定容—测量吸光度计算总黄酮含量添加剂。1.2.2实验步骤不仅如此.夏枯草在我国种植广泛.资源极其将10.0g夏枯草粉末与一定体积浓度的乙醇丰富.是人们十分喜爱的一种饮品。目前夏枯草的(50%、65%、70%、75%、90%)按一定料液比例(m/活性成分研究主要集中在多糖类成分.黄酮类成mL,1:8、1:12、h16、1:20、1:24)混合,在一定温度下分的研究较少.本文以夏枯草中总黄酮为研究对(40℃、50%、60℃、70℃、8ooc)提取一定时间(20min、象.考察了夏枯草中总黄酮的提取工艺.

5、旨在为夏30rain、40min、50min、60min)枯草中提取黄酮类物质以及在饲料领域中的综合提取液真空抽滤.滤液用65%乙醇溶液定容开发应用提供理论参考至100mL容量瓶中。然后准确量取适量提取液于50mL容量瓶中,加5%NAN021.5mL,摇匀。放置量瓶中定容。得芦丁乙醇溶液吸取芦丁乙醇溶液6分钟;加10%Al(N03)31.5mL,摇匀,放置6分0.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL、10.0mL,分别钟;加4%NaOH20mL,加65%乙醇至刻度,摇置50mL量瓶中,加5%NAN021.5mL。摇匀.放匀,放置l

6、0分钟。最后用分光光度计在510nm波置6分钟,加10%Al(N03)31.5mL.摇匀.放置6长下测定吸光度值。并计算总黄酮含量。分钟.加4%NaOH20mL再加75%乙醇至刻度.1.2.3标准曲线制作摇匀.放置13分钟最后用分光光度计在最准确称取干燥至恒重的芦丁20.30mg,加适量510nm波长下测定吸光度值。结果如表1所示:75%乙醇,微热使之溶解。自然冷却后,置100mL表1芦丁标准曲线对上表的数据做回归处理得回归方程:在提取温度70℃和固液比1:16的条件下.用80%A=7.3384C+0.2575R=0.9984的乙醇按实验步骤分别处

7、理时间为:20min、1.2.4总黄酮含量的测定:30min、40min、50min、60min。结果如表3所示:配取定量试液按照实验步骤绘制标准曲线.表3提取时间对夏枯草总黄酮提取率的影响用分光光度计在510nm处测定吸光度.按回归方时间(min)2030405060含量(%)0.43300.51960.69281.02850.8607程计算样品液中总黄酮的提取率(mg/g)。实验结果表明.随着提取时间的延长.夏枯草总黄酮提取率(%):mj蒿篷星塑堑签中总黄酮提取率显著增大.当提取时间大于×100%50min时.总黄酮提取率反而下降.这是由于夏枯

8、2实验结果与分析草中总黄酮已基本浸出.再延长提取时间反而可能会使总黄酮分解.导致提取率的降低.出于实验2.1单因素实验的可

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