苹果多酚提取物对体外蛋白质非酶糖化的抑制作用.pdf

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1、中国食物与营养2014，20(8)：52-55FoodandNutritioninChina苹果多酚提取物对体外蛋白质非酶糖化的抑制作用王晓燕，刘杰超，张春岭，陈大磊，焦中高(中国农业科学院郑州果树研究所，郑9-I,l450009；三门峡湖滨果汁有限公司，河南三门峡472000)摘要：采用牛血清白蛋白一葡萄糖非酶糖化反应体系，研究苹果多酚提取物对体外蛋白质非酶糖化反应进程的影响。结果表明，苹果多酚提取物对蛋白质非酶糖化反应中间产物Amadori和高级糖化终末产物(AGEs)的形成均具有较强的抑制作用并呈明显的量效关系；在试验条件下，苹果多酚提取物对蛋白质非酶糖化反应中间产物Amadori

2、和AGEs形成的最大抑制率分别可达80．85％和98．36％，IC分别为0．40g／L和0．28g／L。说明苹果多酚提取物可能对糖尿病并发症具有一定的防治作用。关键词：苹果多酚；非酶糖化；抑制糖尿病慢性并发症是威胁患者生命及影响生存质量究提出了一条综合利用苹果浓缩汁加工中废弃多酚资源的主要因素。现代医学研究表明，糖尿病人由于体内一的工艺技术路线，并证实按照该工艺制备的苹果多直维持较高的血糖水平，使得体内组织中非酶糖化酚提取物可有效抑制仅．淀粉酶和仅．葡萄糖苷酶活性，(Non—enzymaticglycosylation，NEG)反应加速进行，并因此可用于延缓人体对葡萄糖等单糖的释放和吸收

3、，抑造成了高级糖化终末产物(Advancedglycationendprod—制2型糖尿病人的餐后血糖的快速升高。本文在此基础ucts，AGEs)在体内的大量积累⋯。AGEs可进一步通过上采用牛血清白蛋白．葡萄糖非酶糖化反应体系，进一与体内组织中蛋白质、脂类、核酸等大分子物质交联而步研究苹果多酚提取物对蛋白质非酶糖化反应进程的影影响其理化性质和生物学功能，并通过受体系统的转导响，以期为预防和治疗AGEs积累引起的糖尿病慢性并引起细胞代谢改变和功能紊乱，最终造成动脉粥样硬发症、拓宽苹果多酚提取物的应用范围提供理论参考和化、微血管病变、视网膜病、。f1J',球基底膜通透性升高科学依据。致糖尿

4、病性肾病等糖尿病慢性并发症的发生和发展。因此，积极寻找非酶糖化反应抑制剂、利用外源抑制剂1材料与方法阻止AGEs的生成是防止糖尿病并发症发生和发展的重1．1材料与试剂要手段之一。近年来，随着天然产物化学的快速发苹果多酚提取物，根据文献[15]工艺制备；牛血展以及人们对食品、药品安全要求的不断提高，国内外清白蛋白(Bovineserumalbumin，BSA)，Sigma公司；众多研究者把目光转向了天然植物中的生物活性成分，氯化硝基四氮唑蓝(NitrotetrazoliumBluechloride，越来越多的中草药或其它植物组织中的多酚、多糖等提r，)，上海恒星应用化学研究所；其它试剂均为

5、国产取物被证实对蛋白质非酶糖化具有抑制作用，从而可能分析纯。在糖尿病慢性并发症防治中发挥作用。。多酚物质是苹果及其加工产品中重要的功能性成分1．2仪器与设备之一，具有多种生理活l生与功能。但在苹果浓缩汁加工SPECORD50型紫外／可见分光光度计(德国Analy—中，多酚物质的存在又使苹果汁极易发生褐变和后混tikJenaAG公司)；F-7000荧光分光光度计(日本HI．浊，严重影响苹果浓缩汁产品的感官品质和理化稳定TACHI公司)；BS214D电子天平(德国赛多利斯公司)；性”。因此，在高品质苹果浓缩汁加工中常需除去其中PHS一3C型酸度计(上海精密科学仪器有限公司)；HG。的多酚物质

6、，以保证产品的贮存稳定性。为了充分利用303电热恒温培养箱(南京电器三厂)；DZKW型电子苹果多酚资源，我们结合苹果浓缩汁加工工艺过程，研恒温水浴锅(北京市光明医疗仪器厂)。基金项目：河南省重大科技攻关计划资助项目(项目编号：0522010700)；公益性行业(农业)科研专项资助项目(项目编号：201303076)作者简介：王晓燕(1972一)，女，学士，工程师，研究方向为果品加工。通讯作者：焦中高(1972一)，男，博士，副研究员，研究方向为果品营养与保鲜加工。第8期王晓燕等：苹果多酚提取物对体外蛋白质非酶糖化的抑制作用531．3试验方法终可形成不被酶降解的交联体——高级糖化终末产物1

7、．3．1蛋白质非酶糖化反应体系的建立(AGEs)。由牛血清白蛋白和葡萄糖形成的高级糖化终根据文献[8，15]的方法，以牛血清白蛋白和葡萄糖末产物(AGEs)为褐色物质，可由特征性的荧光吸收组成蛋白质非酶糖化反应体系。将牛血清白蛋白和葡萄(Ex370nm／Em440nm)和紫外吸收光谱来鉴定。糖分别用0．1mol／L、pH=7．4的磷酸盐缓冲液溶解，图1为牛血清白蛋白(BSA)和牛血清白蛋白同时加人0．02％的叠氮化钠和不同浓度的苹果