两种双水相体系提取枇杷叶中黄酮的工艺研究.pdf

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1、亿亏与耋物Z程2014．VoI．31No．04田Chemistry&Bioengineeringdoi：10．3969／j．issn．1672—5425．2014．04．015两种双水相体系提取枇杷叶中黄酮的工艺研究王丽。费春芳(常州工学院理学院，江苏常州213022)摘要：以枇杷叶为原料，利用双水相体系提取黄酮。考察了聚乙二醇一硫酸铵体系和乙醇一硫酸铵体系中各物质用量、料波比(g：mL，下同)、pH值、提取温度、提取时间等条件对提取效率的影响．并对两种体系的提取效率进行了比较。结果表明：聚乙二醇一硫酸铵体系

2、中．在聚乙二醇用量为2．0g、硫酸铵用量为1．5g、料液比为0．3：10、pH值为9、提取温度为4O℃、提取时间为1．5h的条件下，提取效率最高，达5．8O；乙醇一硫酸铵体系中，在无水乙醇用量为4．0mL、硫酸铵用量为1．8g、料液比为0．2：10、提取温度为4O℃、提取时间为1．0h的条件下，提取效率最高。达7．49；可见乙醇一硫酸铵体系的黄酮提取效率高于聚乙二醇一硫酸铵体系。关键词：枇杷叶；黄酮；双水相；紫外可见分光光度法中图分类号：O628．2文献标识码：A文章编号：l672—5425(2O14)04—

3、0055-05枇杷叶是传统中草药。目前从枇杷叶中分离的有制造有限公司。效成分主要有挥发油、三萜酸类、倍半萜类、黄酮类、多1．2方法酚类、有机酸类等【1]。从枇杷叶中提取黄酮的方法主1．2．1枇杷叶处理要有：水浸提取法[4]、乙醇提取法[5]、超声波提取法12引、取新鲜的枇杷叶，洗净，于6O℃烘箱中烘2h，用微波辅助萃取法等。由于双水相萃取技术[8避免了高速粉碎机粉碎，保存于试剂瓶中，待用。有毒试剂的使用，能够提供温和的水环境，具有活性损1．2．2芦丁标准曲线的绘制失小等特点，因此，作者在此研究了聚乙二醇一硫酸

4、铵分别量取1．OOmL、2．00mL、3．OOmL、4．O0和乙醇一硫酸铵两种双水相体系提取枇杷叶中黄酮的mL、5．O0mL、6．00mL、7．O0mL芦丁标准溶液置于工艺过程，优化了提取工艺条件，并比较了两种体系的7个25mL容量瓶(编号l#～7)中，加入1．00mL提取效率。5NaNO2溶液，轻轻摇匀，放置6min；加入1．OomL1OAI(NO。)。溶液，轻轻摇匀，放置6rainI力口入1实验3．O0mL4NaOH溶液，加水稀释至刻度，摇匀，放1．1材料、试剂与仪器置15rain；取6容量瓶，用紫外可见

5、分光光度计扫描枇杷叶采摘于常州工学院新北校区。其波长，然后在最大波长下，以空白试剂作参比，测7芦丁标准品，聚乙二醇2000，十二烷基苯磺酸钠组溶液的吸光度，以芦丁标准溶液浓度为横坐标、吸光(SDBS)，十四烷基三甲基氯化铵(≥99％)，硫酸铵，正度为纵坐标绘制标准曲线。丁醇，无水乙醇，氢氧化钠，硝酸铝，亚硝酸钠，均为分本实验以E值(溶液的吸光度乘以稀释倍数和原析纯。液的体积后，除以原料的质量，正比于提取效率)表示TU一190l型紫外可见分光光度计，北京普析通用提取效率，进行提取工艺的优化及提取效率的比较。仪器

6、有限责任公司；FA1004B型电子天平，上海超平1．2．3黄酮提取及含量测定科学仪器有限公司；SK2210LHC型超声波清洗器，上聚乙二醇一硫酸铵体系：取25mL比色管，加入海科导超声仪器有限公司；TDL80型台式离心机，上2．0g聚乙二醇、1．5g硫酸铵、0．3g枇杷叶粉、pH值海安亭科学仪器厂；F80型高速粉碎机，江苏金坛金城为9的缓冲溶液至10．0mL，于40℃提取1．5h，取上国胜实验仪器厂；恒温水浴加热器，江苏金坛荣华仪器层清液，按黄酮的亚硝酸钠一硝酸铝一氢氧化钠检测收稿日期：2013—12—18作

7、者简介：王丽(1977一)，女．江苏南通人，实验师，研究方向：化工分析与检测．E—mail：wangli@CZU．Crl。王丽等：两种双水相体系提取枇杷叶中黄酮的工艺研究／2014年第4期法。处理，于497．5rim处测定吸光度，计算E值。2．3．2硫酸铵用量对提取效率的影响乙醇一硫酸铵体系：取25mL比色管，加入4．0mL在聚乙二醇一硫酸铵体系中加入2．0g聚乙二醇、无水乙醇、1．8g硫酸铵、0．2g枇杷叶粉、去离子水至不同量(1．Og、1．5g、2．0g、2．5g、3．0g)的硫酸铵，然1O．0mL，于4

8、0℃提取1．0h。取上层清液，同法处后加入0．3g枇杷叶粉、pH值为9的缓冲溶液至理，于波长497．5rim处测定吸光度，计算E值。10．0mL，于40℃提取1．5h，测定吸光度，考察硫酸铵用量对提取效率的影响，结果见图3。2结果与讨论0．75O．7O2．1最大吸收波长的确定O．65按1．2．2方法用紫外可见分光光度计扫描，确定O．600．55芦丁的最大吸收波长为497．5rim。0．502．2芦丁