大黄素抑制体外淋巴细胞增殖的作用研究.doc

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1、大黄素抑制体外淋巴细胞增殖的作用研究【关键词】淋巴细胞;细胞增殖;大黄素;免疫耐受Inhibitoryeffectsofemodinonproliferationofhumanlymphocytesinvitro[Abstract】AIM:Toevaluatetheinhibitoryeffectsofemodinonprolifercytesinvitroandtoeechanism.METHODS:HdlymphocytesisolatswereculturedwithpPHA),interleukin2(tecuIture(MLC),reredb

2、ydifferentageneproliferationofhuobservedbyMTT.RESUncentrationsfrom3Xol/L,emodincouldsutionoflymphocytesiLCobviously,andshotrationdependentinalsoemodinhadasynesAiniinmunosuppreationofhuman1ymphoxploreitspossiblemumanperipheralblooedfromheaIthydonorhytohemagglutinin(IL2)ormixedleu

3、kocyspectively.Interfets,emodinandCsA,thman1ymphocyteswasLTS:Intherangeofco10-6mol/Lto3X10-5mppresstheproliferanducedbyPHA,IL2orMwedapositiveconcenhibitoryeffect.AndrgisticeffectwithCssivebehavior.CONCLUSION:Emodinexertsitsimmunosuppressiveeffectsthroughinhibitingtheproliferatio

4、noflymphocytesinvitro.[Keywords]lymphocytes;cellproliferation;emodin;immunetolerance【摘要】目的:研究大黄素的体外免疫抑制作用,探讨其可能的作用机制.方法:通过PHA,IL2及MLC活化淋巴细胞,给予大黄素和CsA干预,采用MTT法观察比较大黄素和CsA对淋巴细胞活化的抑制作用•结果:在3X10-6〜3X10-5mol/L的浓度范围内,大黄素对PHA,IL2及MLC引起的淋巴细胞活化表现出明显的抑制作用,其作用随浓度增加而增强,并与CsA具有协同性•结论:大黄素在体外通

5、过抑制淋巴细胞增殖来发挥其免疫抑制作用.【关键词】淋巴细胞;细胞增殖;大黄素;免疫耐受0引言大黄素属蔥醍类,是蓼科植物提取的主要成分•具有抗肿瘤、抗炎抑菌及保护肝肾等作用[1-3]•我们观察emodin对离体淋巴细胞活化的影响,并与环胞素A比较,研究两者的协同性,以探讨emodin在移植免疫抑制中的作用.1材料和方法材料emodin由陕西省药品检验所提供;CsA由Novartis公司提供;淋巴细胞分离液、四甲基偶氮哇盐,重组人IL2均购自晶美公司;新生牛血清由杭州四季青生物工程研究所提供;RPMI1640,植物血凝素分别购自Gibco公司和上海市医学化

6、验所.方法实验分为正常对照组、CsA组,emodin大,中,小剂量组,CsA与emodin联用组.外周血淋巴细胞取自健康成年人静脉血,细胞密度为1X109/L,按200UL/孔培养于96孔培养板中,每组设6个复孔,同时设2个复孔对照,置入37°CC02的孵育箱中培养.①PHA与IL2刺激组:分别将PHA溶液按1:50的比例、IL2贮存液按1:40的比例加入淋巴细胞悬液中,分组给药后培养•②MLC组:采用双向混合淋巴细胞培养,取两位健康成年人无菌外周静脉血,分别制备外周血淋巴细胞.将供者、受者淋巴细胞每孔分别加入各100UL,分组给药后培养•培养24,4

7、8,72h后用四甲基偶氮哇盐法于酶联免疫分析仪上检测各孔的吸光度值.淋巴细胞增殖抑制率=[1-/]X100%.统计学处理:数据均用x±s表示,各组淋巴细胞增殖抑制率比较用重复测量设计的方差分析.P2结果在PHA,IL2刺激或混合淋巴细胞培养后24,48,72h后,emodin对不同刺激原引起的淋巴细胞增殖较正常对照组均表现出与CsA组一致的抑制作用,但其抑制强度弱于CsA组•在48和72h,CsA与大黄素联用组表现出较CsA单剂组更高的淋巴细胞增殖抑制率,但组间差异无统计学意义.在3X10-5〜3X10-6mol/L的浓度范围内,抑制率表现出一定的剂量

8、依赖性.同时,各实验组对淋巴细胞增殖的抑制作用均表现出随作用时间推移而呈逐渐增强趋势.图1PH

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