大黄素、黄芪多糖在体外对乙型肝炎病毒的抑制作用.doc

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1、周年庆典活动策划方案周年庆典活动一般分下面几部分第一部分锁张正国张欣宋平边静程延安【摘要】目的体外观察大黄素、黄芪多糖单用与联合应用抗HBV的作用。方法以细胞为研究模型，选用干扰素a、拉米夫定为阳性对照药物，观察培养液中加入不同浓度大黄素、黄芪多糖及两药联合应用抗HBV作用的效果。采用Taqman荧光定量PCR检测细胞上清HBVDNA,ELISA检测培养上清液HBsAg、HBeAg水平的变化。采用MTT法观察它们对细胞生长的影响。结果大黄素的3个剂量组（、、/L）和所观察的时间点（3、6、9d）对HBVDNA、HBsAg

2、、HBeAg表现出剂量与时间依赖的抑制作用（P）。大黄素、黄芪多糖联合应用在疗效方面无明显的交互作用（P〉）。结论大黄素在体外对HBV具有一定的抑制作用，黄芪多糖无明显抑制HBV的作用，两药联用无明显协同抗HBV的作用。【关键词】大黄素；黄芪多糖；乙型肝炎病毒；细胞培养InhibitiononhepatitisBvirusbyemodinandastragaluspolysaccharidesinvitroABSTRACT:Objectiveffectsofemodin,astides(APS)onhepatitToin

3、vestigatetheeragaluspolysaccharisBvirus(HBV)invitro.MethodsHumanhelyexpressedhepatitnculture.Thecellswentconcentrationsoa,andlamivudintimePCRwasappliedlularHBVDNAandELISsHBsAgandHBeAg.MTTuatethecytotoxicitheresultsshowedthaemodinresultedinatimeandconcentrationdep

4、endentinhibitionofHBVDNAreplieationandHBsAg,HBeApatomacel11inestabisBvirusparticlesiereexposedtodifferfemodin,APS,interferon,respectively.RealtoquantifyextracelAwasappliedtoassesassaywasusedtoevalyofdrugs.ResultsTtexposureofcellstogsecretion(P).Theinteractionwasn

5、otsignificantbetweenemodinandAPS(P>).ConelusionEmodinhadtimeandconcentrationdependentinhibitoryeffectstoHBVinvitroinsomeextent；APScouldnotinhibitHBVobviouslyinvitro；CoadministrationofemodinandAPShadnotsignificantinteractioninrestrainingHBVinvitro.KEYWORDS：emodin；

6、astragaluspolysaccharides；hepatitisBvirus；cellculture病毒性乙型肝炎的治疗关键是抗病毒治疗。中药在肝病治疗中起着很重要的作用。大黄和黄芪是治疗乙肝复方中最常用到的两味中药。近年来，研究证明它们对乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV）有一定的治疗作用。大黄素（emodin）是中药大黄的主要有效单体，黄芪多糖（astragaluspolysaccharides,APS）是黄芪的主要有效成分。本研究以细胞为体外HBV复制模型，初步观察大黄素、黄芪多糖单独及联合

7、应用对HBV的抑制作用。1材料与方法药物大黄素（纯度950g/L购自西安崇信天然添加剂有限公司，由国家中药鉴定所鉴定，批文号：25100806），黄芪多糖（纯度为600g/L,西安鸿生生物技术有限公司生产，国家中药鉴定所鉴定，批号：040618），干扰素a（购自罗氏公司，批号：010801I），拉米夫定（3TC）/L的母液，由西安交通大学药学院提供。试剂及主要仪器噻唑蓝（MTT，Sigma）,二甲基亚砜（DMSO,Sigma）,HBsAg和HBeAg的ELESA检测试剂盒（上海华泰生物工程公司），HBVDNA提取及扩增荧

8、光检测试剂盒（广州中山大学迗安基因股份有限公司），和PE7700型自动荧光PCR仪（美国PerkinElmer公司）。细胞细胞由第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心惠赠，可稳定表迗乙肝病毒蛋白并分泌病毒颗粒。培养液为DMEM（Gibc0），含200mL/L胎牛血清（杭州四季青生物材料公司）、/L谷氨酰胺（Gibco