乙型肝炎病毒前S1抗原临床应用价值分析（附106例报告）.doc

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1、乙型肝炎病毒前S1抗原临床应用价值分析(附106例报告)【关键词】HBVMPreSlAgHBV-DNA乙型肝炎我国屈于乙型肝炎病毒高发区，乙烈肝炎匕经成为危害我国人民身体健康的社会公众性问题，乙型肝炎病毒血淸标志物(HBVM)作为乙型肝炎病毒诊断的常规项目L1不能满足临床，HBV-DNA.病毒农面抗原(HBsAg)、乙肝病毒前SI(Pre-S1)抗原作为HBV在人体内感染和复制的证据［1］。乙型肝炎病毒前Pre-SIAg是乙型病毒性肝炎的表面抗原(HBeAg)纽.成成分之,一=Pre-SIAg是乙肝病毒

2、外膜蛋白的重要组成部分，在乙肝病毒的装配、传染性方面起着关键作用，并且病毒附着于肝细胞上，最重要的介导部位是前S1蛋白的氨基酸(AA)21-47片段,变异的病毒只耍这一区段完好就有传染性。文献资料表明，前S1抗原的存在反应病毒的活动性复制和肝脏损害的指标。通过对106例HBsAg阳性的乙肝病毒感染血清中Pre-S1Ag,HBVM,HBV-DNA的分析，探讨乙肝病毒PreSlAg在HBVM中的临床意义，为评价病毒感染、传染性、复制及肝细胞损伤提供新的证据。1材料与方法11标本來源标本均収自本院2006年5

3、月〜2007年8月的门诊和住院的经检查为HBsAg为阳性的患者106例。英中男72例，女34例°年龄15〜70岁，平均年龄36岁。所有病例均排除其他各型肝炎的混合感染。12方法121仪器和试剂检测HBV-DNA的PCR扩增试剂山广州达安公司提供。检测仪为DA7600型基因扩增仪。乙肝两对半检测试剂购自上海科华生物工程股份有限公司。乙肝病毒PreSIAg检测的ELISA试剂购白中国科学院上海生化研究所阿尔法生物技术有限公司；122乙肝两对半以及Pre-SI检测乙肝两对半检测采用ELISA法，完全按照说明操

4、作。Pre-S1Ag检测按照上海阿尔法生物技术有限公司提供的ELISA操作步骤和结果判定方式进行编程，该实验为两步法，采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法，以固相化的人工化学合成的前S1蛋白21〜47aa肽进行免疫制备前S1蛋白单抗捕获标本中的乙肝前S1抗原，辣根过氧化酶标记的抗Pre-S1单抗为二抗來检测Pre-S1Ag,同样采用全白动免疫分析仪进行检测。123血清HBV-DNA检测DNA提収取血清标本、阴性质控晶、临界阳性质控品、室内质控品各100μL加等量浓缩液混匀,lOOOOrpm离心lOmi

5、n,去上清加20μLDNA捉収液混匀。「•浴lOniin(误差不超过lmin)olOOOOrpm离心5min,取上清液5μl做PCR反应。扩增：将点好样的反应管放入PCR仪上，93°C2min预变性，然后按93°C45秒→55°C60秒，反应10个循环，再按93°C30秒→55aC45秒反应30个循环。每批PCR试验均做阴、阳性对照、临界阳性。13统计学方法采用SPSS80统计软件，计数资料采用χ2检验，显著性检验水准为α=O05。2结果106例HBs

6、Ag阳性的乙肝病毒感染血清屮PreSIAg>HBVM.HBV-DNA的结果见表1。山表1可知，HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组(即大三阳组)与HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组(即小三阳组)PreSlAg比较pVO05,差异有统计学意义;HBsAg、HBeAg阳性组与HBsAg、HBcAb阳性组比较p<005,差异有统计学意义。衣1106例HBsAg阳性的乙肝病毒感染血清中PreSlAg、HBVM、HBV-DNA的检测结果3讨论目前，国内检测HBsAg绝大多数应用ELISA中双抗体夹心双位

7、点一步法，当标本中HBsAg含量过高吋，会因钩状效应出现而引起假阴性[2]。山于HBVM检测所用的试剂为一步法，抗原抗体反应会产生“钩状效应”而产生假阴性结果，PreSlAg检测是两步法，避免了“钩状效应“的产生，同时检测HBV-M.PreSl能够起到相互提示作用，最大程度减少假阴性结果的产生。乙型肝炎対人类危害性极大，病毒的活跃复制是启动或激发肝脏组织炎症反应的因素。从PreSlAg立性的角度检测对临床诊断有十分重要的意义。本次统计显示HBsAg.HBeAg.HBcAb阳性纽PreSlAg阳性率(79

8、07%)明显高于HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性纽.PreSlAg阳性率(4038%)；HBsAg、HBeAg阳性组PreSlAg阳性率(8333%)明显高于HBsAg、HBcAb阳性组PreS1Ag阳性率阳性率(20%),提示HBeAg阳性组中PreS1Ag阳性率明显高于HBeAg阴纽.，提示PreSlAg是一个与HBeAg同时存在的较好指标。因为在HBsAg阳性血清中主耍以HBeAg阴、阳性分不同模式纽。HBeAg是由基因组35k