微生物的实验室培养 (一).doc

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1、微生物的实验室培养（一）微生物的实验室培养（一）【学习目标】1•举例说明有关培养基的基础知识A2•概述无菌操作技术包括的主耍内容A【知识要点】一、培养基（问题：培养基种类、基本成分有哪些、举例说出添加特殊成分情况）1•培养基的种类包括培养基和培养基等。2.培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分。3•在提供上述儿种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、_以及等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加;培养霉菌吋需要将培养基的PH调至；培养细菌时需耍将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供

2、无氧的条件。二、无菌技术（问题：获得纯净培养物的关键是什么？避免杂菌污染的方法主要包括几个内容？消毒和灭菌有何区别？）1•获得纯净培养物的关键是。避免杂菌污染的方法主耍包括以下四个内容：%1对实验操作的、操作者的衣着和手进行清洁和。%1将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行。%1为避免周围环境屮微生物的污染，实验操作应在附近进行。④实验操作时应避免己经灭菌处理的材料用具与相接触。2.消毒和灭菌探究活动一、消毒与灭菌的比较二、实验操作（问题：大肠杆菌的纯化培养用何培养基？制备牛肉膏蛋白腺固体培养基步骤?对

3、微生物进行分类、鉴定的重要依据？纯化大肠杆菌最常用的方法?方法如何操作？）1•本实验用培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分成和两个阶段进行。2.制备牛肉膏蛋白月东固体培养基步骤一--*—倒平板探究活动二、有关“倒平板”操作1（1）培养基灭菌后，需耍冷却到50C左右，才用来倒平板。你用什么方法来估计培养基温度？（2）为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？（3）平板冷凝后，为什么耍将平板倒置？（4）在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？2.对微生物进行分类、鉴定的

4、重要依据是3.纯化大肠杆菌微生物接种的方法中最常用的是和。(1)平板划线法是指接种环在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种到培养基的表面。探究活动三、有关“平板划线法”操作%1为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？%1在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？%1在作第二次以及其后的划线操作是为什么总是从上一次划线的末端开始划线？(2)稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的,然后将不同的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度的菌液时

5、，聚集在一起的微生物将被分散成,从而能在培养基表面形成单个的O探究活动四、有关“稀释涂布平板法”操作%1系列稀释操作中应注意的事项有哪些？%1涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行，结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，涂布平板操作的第2步应如何进行无菌操作?02三、结果分析与评价1.如果接种大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，说明接种符合要求。2.若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程屮未达到要求。3.的作为对照的培养基，在培养过程中出现了菌落，则说明培养基不彻底，实验失败。四、菌种的保

6、存1•对于频繁使用的菌种，我们可以采用法；2.对于需要长期保存的菌种，可以采用法。随堂练习1.下列措施中不属于消毒的是（）A.酒精擦拭双手B.向水中通入少量CI2C.皮扶受伤处涂紫药水D.灼烧接种环1.冇关平板划线操作的叙述，正确的是（）A.使用己灭菌的接种环、培养皿，操作过程屮不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C.把皿盖打开，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放入培养箱中培养3•下列有关平板划线接种法的操作错误的是（）A.将接种环放在火焰上

7、燃烧B.将已冷却的接种环伸入菌液屮蘸取一环菌液C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D.接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连1.关于制备牛肉膏蛋白腺固体培养基的叙述错误的是（）A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯0C.等培养基冷却至50C左右时进行倒平板D.将平板冷却凝固5-10分钟后将平板倒过來放置2.细菌培养过程分别釆用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）A.接种环、手、培养基B.高压锅、手、接种环A.培养基、手、

8、接种环D.接种环、手、高压锅1.冇关稀释涂布平板法的叙述错误的是（）A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面C.适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落2.如右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1-2-3-4->5o下列操作方法正确的是（）A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B.划线操作须在