选修一专题二微生物的实验室培养.doc

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1、选修一专题二微生物的实验室培养专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养【自主学习】一、培养基概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。据其物理性质，可分为培养基和培养基，前者不加,如琼脂，后者需要加入该物质。以及的耍求。3.培养乳酸杆菌吋需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：（一）获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：1.对实验操作的、操作者的和进行°2.将用于微生物培养的、和等器具进行1.为避免周围环境中微生物的污染，实验操

2、作应在附近进行。1.实验操作时应避免己经灭菌处理的材料用具与相接触。（二）消毒和灭菌1•消毒是指用较为温和的方法杀死（不包括)o(1)口常生活中常用的消毒方法是消毒法。(2)对一些不耐高温的液体，则使用消毒法。(3)对接种室、接种箱或超净工作台可使用照射进行物理消毒，照射前可适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等以增强消毒效果。（4）实验操作者的双手使用进行消毒。（5）饮用水水源用进行消毒。2.灭菌是指用强烈的杀死O常用的方法冇:菌。(1)接种环、接种针、试管口等使用灭菌法。(2)玻璃器皿、金属用具等使用灭菌法。(3)培养基、无菌水等使用灭菌法，将灭菌物品放(4)置在物品装入

3、高压蒸汽灭菌锅灭菌后，耍首先打开排气阀，煮沸并;随后关闭排气排除锅内冷空气，其目的min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至吋打开锅盖，其冃的是防止。三、实验操作■…大肠杆菌的纯化培养：两个阶段进行。（一）、制备牛肉膏蛋白腺固体培养基1.制备牛肉膏蛋白月东固体培养基的操作步骤是：2•营养构成：各种,此外还要满足培养基一般都含有微生物生长对本实验所用的培养基,本实验可分成-12.倒平板：待培养基冷却至其过程是：①在火焰旁右手拿,左手拔出棉塞；②使锥形瓶的瓶口;③左手将培养皿右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。④待平板冷却凝固后，将平（二）、纯化大肠杆菌微生物

4、接种：最常用的是法和法。1•平板划线法是通过在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。可以分离到由繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，即为菌落。其操作步骤是：①将在酒精灯火焰上灼烧直至。②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到的目的。④将冷却的接种环伸入到O⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙，把划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将相连。⑧将平板培养。分析：(1)取菌种前灼烧接种环的目的是;除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的原因是;取菌种和划线前都要

5、求接种环冷却后进行，其目的是(2)最后灼烧接种环的目的是在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是2.稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。系列稀释操作：①取盛有mL水的无菌试管6支，编号101、102、103>104>105、106o②用灼烧冷却的移液管吸取mL菌液注入编号为101试管屮，并吹吸3次使菌液与无菌水充分混匀。③从10：［倍液中吸取mL菌液注入到编号为102试管内吹吸均匀，获不要划破培养基。⑦灼烧接种环，冷却后从得102倍液。依此类推。接种环盖上皿盖,【课后练习1]1、关于微生

6、物营养物质的叙述中，正确的是（）A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量2、不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列冇关一种以C02为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不•正确的是（）・・A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养耍素之一3、下列措施中不属于消毒的是（）A•酒精擦拭双手向水中通入少量以CI2C・皮肤受伤处涂紫药水D・灼烧接种环4、下列有关细菌培养的叙述，正确的是（）A.在琼脂固体培养基上长出的单

7、个菌落含冇多种细菌B.在培养基屮加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长・・2C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长A.在半固体培养基屮接种细菌培养后可观察其运动5、高中生物学实验中，在接种吋不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上6、下列有关培养基的叙述正确的是（）D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上（）A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微