噬菌体展示技术及其在抗体制备中应用的研究进展.pdf

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1、南昌大学学报（医学版）２０１４年第５４卷第２期ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｃｈａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ）２０１４，Ｖｏｌ．５４Ｎｏ．２８３噬菌体展示技术及其在抗体制备中应用的研究进展１２２２２２１张家禾，左伟勇，洪伟鸣，管远红，孟婷，刘莉，周作红（１．江西农业大学动物科学技术学院基础兽医学动物组织胚胎学教研室，南昌３３００４５；２．江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州２２５３００）摘要：本文对噬菌体展示抗体技术进行了系统性阐述，包括载体、蛋白融合、引物设计、构建方法、筛选技术等。并对其在抗体制备中的近年来的

2、国内外最新研究进展进行了综述，最后对这一抗体制备技术进行了科学性展望。关键词：噬菌体表面展示技术；单链抗体；研究进展中图分类号：Ｑ７８２文献标志码：Ａ文章编号：２０９５－４７２７（２０１４）０２－００８３－０６ＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｇｒｅｓｓｉｎＰｈａｇｅＤｉｓｐｌａｙＡｎｔｉｂｏｄｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＩｔｓＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ１，ＺＵＯＷｅｉｙｏｎｇ２，ＨＯＮＧＷｅｉｍｉｎｇ２，ＧＵＡＮＹｕａｎｈｏｎｇ２，ＺＨＡＮＧＪｉａｈｅ２，ＬＩＵＬｉ２，ＺＨＯＵＺｕｏｈｏｎｇ１ＭＥＮＧＴｉｎｇ（１．ＡｎｉｍａｌＨｉｓｔｏｌｏｇｙａｎｄ

3、ＥｍｂｒｙｏｌｏｇｙＲｏｏｍ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢａｓｉｃＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＪｉａｎｇｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００４５，Ｃｈｉｎａ；２．ＪｉａｎｇｓｕＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌＤｒｕｇ，Ｔａｉｚｈｏｕ２２５３００，Ｃｈｉｎａ）ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｉｎｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙａｎｔｉｂ

4、ｏｄｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｖｅｃｔｏｒ，ｐｒｏｔｅｉｎｆｕｓｉｏｎ，ｐｒｉｍｅｒｄｅｓｉｇｎ，ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ，ｓｃｒｅｅｎｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ａｎｄｓｏｏｎ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗｓｕｍｍａｒｉｚｅｓｔｈｅｌａｔｅｓｔｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｉｎａｎｔｉｂｏｄｙｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓｆｏｒｆｕｔｕｒｅｒｅｓｅａｒｃｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｎｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙａｎｔｉｂｏｄｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．ＫＥＹＷＯＲＤＳ：ｐｈａｇｅｓｕ

5、ｒｆａｃｅｄｉｓｐｌａｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ｓｉｎｇｌｅｃｈａｉｎａｎｔｉｂｏｄｙ；ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓ抗体是指动物机体受到抗原物质刺激后，由Ｂ其他分子生物学技术的飞速发展，人们运用分子生淋巴细胞转化成浆细胞产生的，能与相应抗原发生物学手段制备了基因工程抗体，被称为第三代抗体。特异性结合反应的免疫球蛋白。抗体的发展经历了鼠杂交瘤制备单克隆抗体技术被证明是十分困３个阶段：第一阶段，由于采用传统的免疫方法中抗难的，而且存在以下缺点：产生的抗体数量少、需要［２］原通常具有多个抗原决定簇，抗原在进入机体后可加以免疫、对人体的一些重要抗原不能

6、有效识别，激活许多淋巴细胞克隆，产生针对多种抗原决定簇且人体会对鼠源抗体产生抗鼠抗体反应（ＨＡ［３］的抗体，由此获得的抗血清即多克隆抗体；第二阶ＭＡ）。第三代抗体主要致力于两方面的研究：一［１］段，１９７５年Ｋｈｌｅｒ等将杂交瘤细胞和产生特异是对已有单克隆抗体进行改造，包括单克隆抗体的性抗体的Ｂ细胞融合，形成杂交瘤细胞，获得了第人源化（嵌合抗体、重构抗体）、小分子抗体（ｍｉｎｉ一株单克隆抗体；第三阶段，随着ＤＮＡ重组技术和ｂｏｄｙ、ｄｉａｂｏｄｙ、ｄｓＦｖ、ＳｃＦｖ、Ｆａｂ等）以及抗体融合蛋收稿日期：２０１３１１２６基金项目：安徽省科技攻

7、关项目（１２０１ｃ０６０２００６）；江苏省“青蓝工程”中青年学术带头人项目作者简介：张家禾（１９８７—），男，硕士研究生，主要从事新兽药的研发与药物残留检测。通信作者：周作红，教授，Ｅｍａｉｌ：ｚｕｏｈｏｎｇｚｈ＠１６３．ｃｏｍ。８４南昌大学学报（医学版）２０１４年２月，第５４卷第２期白的制备；二是通过构建抗体库，不需要免疫抗原即２．２蛋白融合可制得单克隆抗体。第三代抗体与杂交瘤单克隆抗研究发现，丝状噬菌体主要有５种外壳蛋白：［８９］体相比，一个免疫噬菌体抗体文库能够富集抗原特ＰⅢ、ＰⅥ、ＰⅦ、ＰⅧ、ＰⅨ，而用于抗体展示的融合异性抗体，能够产生

8、更多以及更好的抗体，甚至亲和蛋白主要有２种：ＰⅢ和ＰⅧ。在ＰⅧ蛋白展示系统［４］力高于从传统技术获得的抗体。在第三代抗体技