噬菌体展示 抗体 噬菌体展示抗体库筛选技术研究进展

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3、ＥＣＨＮＯＬＯＧＹＶｏｌ．１８Ｎｏ．３Ｍａｙ，２００７生物技术通讯综述噬菌体展示抗体库筛选技术研究进展吴雯峰，王双，孙志伟军事医学科学院生物工程研究所，北京１０００７１［摘要］［关键词］噬菌体展示技术已成为制备高亲和力抗体的强有力的工具。而噬菌体抗体库的筛选是在获得高亲和力抗体过程噬菌体展示；噬菌体抗体库；功能筛选；高通量筛选中很关键的一个环节。总结了针对不同复杂程度的抗原所须采用的不同筛选方法，并简单介绍了高通量筛选的优势。［中图分类号］Ｒ３９２．１１［文献标识码］ＡＴｈｅＡｄｖａｎｃｅｓｏｎＳｃｒｅｅｎｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＰｈ

4、ａｇｅ－ＤｉｓｐｌａｙＡｎｔｉｂｏｄｙＬｉｂｒａｒｉｅｓＷＵＷｅｎ－ｆｅｎｇ，ＷＡＮＧＳｈｕａｎｇ，ＳＵＮＺｈｉ－ｗｅｉＢｅｉｊｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００７１，Ｃｈｉｎａ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｈａｓｂｅｃｏｍｅａｐｏｗｅｒｆｕｌｔｏｏｌｉｎｐｒｅｐａｒｉｎｇｈｉｇｈａｆｆｉｎｉｔｙａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ａｎｄｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｐｈａｇｅ－ｄｉｓｐｌａｙａｎｔｉｂｏｄｙｌｉｂｒａｒｉｅｓｉｓａｖｅｒｙｃｒｉｔｉｃａｌｓｔｅｐｔｏｏｂｔａｉｎｈｉｇ

5、ｈａｆｆｉｎｉｔｙａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．ｍｅｔｈｏｄｓｗｈｅｎｓｅｌｅｃｔｉｎｇｏｎａｎｔｉｇｅｎｓｗｈｉｃｈａｒｅｃｏｍｐｌｅｘｏｒｎｏｔ．ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｅｌｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ＴｈｅｒｅｎｅｅｄｔｏｂｅｕｓｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔＴｈｅｍａｉｎｓｅｌｅｃｔｉｏｎｍｅｈｏｄｓａｎｄｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｏｆｈｉｇｈ－ｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙｐｈａｇｅ－ｄｉｓｐｌａｙａｎｔｉｂｏｄｙｌｉｂｒａｒｙｓｅｌｅｃｔｉｏｎｆｏｒｆｕｎｃｔｉｏｎｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｅｌｅｃｔｉｏｎ下筛

6、选折叠良好的分子。而事实上筛选特定功能的抗体既是手段也是目的，在针对某一具体抗原的筛选过程中，可根据抗原的性质或（和）所要获得的抗体的功能特性灵活制定筛选策略。我们从对抗原进行分类的角度（即不同复杂程度的抗原所运用的筛选方法是不同的），简要总结了噬菌体抗体库的筛选方法。噬菌体展示技术最早由美国密苏里大学的Ｓｍｉｔｈ建立于１９８５年［１］。这种技术的基本原理，是将编码外源蛋白或多肽的基因片段插入编码噬菌体外壳蛋白的基因中，使外源蛋白或多肽与噬菌体外壳蛋白融合表达在噬菌体表面，而不影响噬菌体的侵染和扩增能力。其主要特点是将特定分子的基因型和表型

7、统一在同一病毒颗粒内［２，３］。将编码抗体分子片段的基因与噬菌体外壳蛋白基因末端融合，使表达的抗体附着在噬菌体颗粒表面成熟的衣壳蛋白上，就形成了噬菌体抗体。如果将多样性的抗体基因组装到表达载体内，表达到噬菌体表面得到多样性噬菌体抗体的集合，即噬菌体抗体库。根据基因来源，可分为２种不同性质的抗体库，即免疫半合成库和全合成库［２］。库和非免疫库，后者又包括天然库、利用噬菌体抗体库可以直接从库中筛选针对某一抗原的特异性抗体。这种技术将噬菌体表面表达的抗体片段的基因型与表型联系在一起，把抗原分子的结合特性同噬菌体的可扩增性统一起来，成为一种高效的筛

8、选体系。它从根本上改变了传统的单抗制备流程，抗体完全可以绕过免疫系统和免疫步骤在体外制备，并且可以在体外改良抗体的特异性和进行体外亲和力成熟。获得高亲和力的特异性抗体的第一步，就