肝豆状核变性基因诊断与治疗进展-论文.pdf

《肝豆状核变性基因诊断与治疗进展-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、·9O·巾围实用神经疾病杂志2012年2月第15卷第3期ChineseJourna1ofPractica1Nerv0usDiseasesFeb．2012，Vo1．15No．3·综述-N讲座·肝豆状核变性基因诊断与治疗进展李祥杨文明趵△1)安徽中医学院合肥2300382)安徽中医学院第一附属医院神经内科合肥230031【关键词】肝豆状核变性；基因诊断；治疗【中图分类号1R742．4【文献标识码】A【文章编号11673—5110(2012)03—009004Wilson病(Wilson’sdisease，WD)又称肝豆状核变性，聚合酶链反应(polymerasechainreaction，PCR

2、)分析技是较常见的以铜代谢障碍为特征的常染色体单基因隐性遗术是一项模拟DNA体内复制过程的体外DNA扩增技术，传疾病，以脑、肝脏及其他组织细胞内渐进性铜蓄积为发病经过变性一退火一延伸过程，25～3O个循环后，可使模板DNA基础，临床表现多样，但以豆状核变性为主的锥体外系症状片段的数量呈几何级数倍增。上世纪9O年代以来已被广泛和以肝脏病变为主的消化系统症状多见。目前临床上关于用于生物学各领域。当前应用PCR技术检测WD基因主要WD患者的诊断与治疗主要还是采用传统的方法，这给临床是聚合酶链反应一单链构象多态性(polymerasechainreac—工作带来一定的困扰。例如，较多WD患者早期症状

3、复杂多tionsinglestrandconformationpolymorphism，PCR—SSCP)、样，极易被误诊为其他疾病，铜代谢检查又存在假阴性或假PCR一酶切和荧光PCR技术。SSCP的灵敏度较高，可用于单阳性结果。WD的治疗多基于纠正体内铜代谢的异常来进个碱基缺失、插入或置换的检测_3]。由于此法检测的是行，药物治疗是目前临床上缓解wD症状的主要手段之一，ATP7B基因本身，因此适用于一切临床可疑患者。但是，主要是应用青霉胺、二巯基丙磺酸钠、锌剂等药物来排铜，同PCR—SSCP法需要的实验条件各异，且扩增的片段不能过时配合一些保护肝脏、脑神经药物，这种方法在一定程度上长，易出

4、现假阳性或假阴性结果。国内外都已用该方法进行可缓解患者的痛苦，但尚缺乏有效的治疗手段。因此，探寻过WD基因研究。PCR_酶切和荧光PCR技术是针对已知突有效的诊断技术和治疗方法就显得尤为必要，其中根本的诊变位点进行基因研究的方法，Maier首先采用此法对WD断在于基因层面上的探寻。本文就现阶段关于WD的基因基因进行检测，证明了其在WD患者特别是症状前期患者诊诊断新技术的研究进展和治疗手段的补充、更新做一综述断中的价值，而国内马少春、王柠嘲、程楠、黄帆等采用PCR一酶切和荧光PCR技术对WD患者分别进行点突变1WD基因诊断检测。但PCR一酶切和荧光PCR技术由于其自身是选择应目前关于WD基因的

5、诊断新技术研究主要集中在家系用于已知基因突变位点的检测方法，因此其应用条件苛刻。连锁分析、聚合酶链反应(polymerasechainreaction，PCR)变性高效液相色谱(denaturinghighperformanceliquid分析技术、PCR酶切和荧光PCR技术、变性高效液相色谱chromatography，DHPIc)分析是2O世纪9O年代末出现的，(denaturinghighperformanceliquidchromatography．DH—原理是通过比较异源双链与同源双链DNA，可非常精准地PLC)分析技术、DNA测序技术、DNA微阵列技术。家系连发现已知和未知的DN

6、A变异，大大提高了基因突变的检测锁分析包括限制性片段长度多态性(restrictionfragment效率，是诊断WD基因较为理想的方法。Vrabelova等应lengthpolymorphism，RFIP)，短串联重复序列(shorttan—用该技术结合RLFP和DNA测序等技术对WD患者进行检demrepeat，sTR)，单核苷酸多态性(single—nucleotidepoly—测，国内杨静芳等¨l采用DHPLC对中国WD患者进行了检morphism，SNP)等技术，原理是待检家族成员基因与已确诊测，检测结果均较高。DHPLC具有较高的敏感性和特异性，wD遗传标记进行基因连锁分析进行诊

7、断l_1]。早期的WD且操作简单，但此法不能进行单个基因病变部位的定位，只基因诊断主要依赖RFLP，但由于其信息含量少等原因已不可用于大样本筛查。适应目前的临床需要。现在应用家系连锁分析主要是SNPDNA测序技术是目前对WD基因进行DNA序列的最技术，2007年，Harmut等选择了4个WD基因的SNP位常用方法，是WD基因诊断的标准。凡是涉及疾病基因诊断点对印度人WD家系进行检测，检测效果较好，证实SNP具