豆状带绦虫Tp18基因的原核表达及其产物的抗原性分析-论文.pdf

《豆状带绦虫Tp18基因的原核表达及其产物的抗原性分析-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、畜牧兽医学报2013，44(11)：1819—1825ActaVeterinariaetZootechnicaSinicadoi：10．11843／j．issn．0366—6964．2013．11．017豆状带绦虫Tpl8基因的原核表达及其产物的抗原性分析杨德英，陈林，古小彬，赖松家。，孙家刚。，杨光友卜(1．四川农业大学动物医学院，雅安625014；2．四川农业大学动物科技学院，雅安625014；3．四川省苍溪县畜牧食品局，苍溪628400)摘要：为评价豆状带绦虫Tp18重组蛋白对兔豆状囊尾蚴病的免疫保护效果和诊断应用价

2、值，从豆状带绦虫成虫转录组数据库中筛选到Tpl8基因，并进行克隆和原核表达，以纯化后的重组蛋白作为免疫原和反应原。免疫保护试验设计了重组蛋白组、佐剂组和PBS组，共免疫2次(间隔14d)，二免后的第7天用5000个豆状带绦虫虫卵攻虫；攻虫后的第49天屠宰实验兔，统计兔体内豆状囊尾蚴的数量。整个试验过程中每周采血，分离血清进行IgG和IgA水平检测。同时，设计了Tpl8重组蛋白和PBS重复组，试验程序和检测指标均与第一次试验相同。此外，采用Tpl8重组蛋白建立了诊断家兔豆状囊尾蚴病的Dot-ELISA方法，对169份家兔血清

3、进行分析，评估其诊断应用价值。结果表明表达的Tp18基因成熟肽的重组蛋白约为32ku，Westernblotting证明该重组蛋白与豆状带绦虫感染兔阳性血清具有良好的反应原性。Tpl8重组蛋白组的减虫率为95．59(重复组为97．38V0)，极显著高于佐剂组和PBS组(P

4、断抗原，为兔豆状囊尾蚴病的防控提供了理论基础。关键词：豆状带绦虫；T18基因；原核表达；免疫保护；诊断中图分类号：$852．734文献标志码：A文章编号：0366—6964(2013)11-1819—07ProkaryoticExpressionofTp18GenefromTaeniapisiformisandAntigenicityAnalysisoftheExpressedProductYANGDe-ying，CHENLin，GUXiao-bin，LAISong-jia。，SUNJia-ganga，YANGGuang-

5、you(1．CollegeofVeterinaryMedicine，SichuanAgriculturalUniversity，Ya’an625014，China；2．CollegeofAnimalScience＆Technology，SichuanAgriculturalUniversity，Ya’an625014，China；3．AnimalHusbandryFoodstuffBureauofCangxiCounty，Cangxi628400，China)Abstract：Inordertoevaluatetheeff

6、ectofimmunoprotectionanddiagnosisagainstrabbitTaeniapisiforrniscysticercosisbyrecombinantTpl8(rTpl8)protein，Tp18genewasscreenedfromtranscriptomeofadultT．pisiformis，thenwasclonedandexpressed．rTpl8proteinwasusedasimmunogenandatopen．Thesamplesweregroupedintothreeexpe

7、rimentalgroups，includingrTpl8proteingroup，PBSgroupandadjuvantgroup．Immunizationwasperformedtwiceat14一dayintervals．Sevendaysafterthesecondimmunization，eachrabbitwasexperimentallyinfectedorallywith5000matureviableT．pisiformiseggs，andsacrificedat49dayspost—infection．

8、Thenumberofcysticercoidswascounted．Bytheendoftheexperiment，serumWascollectedforde一收稿日期：2013-04—02基金项目：教育部长江学者和创新团队发展计划(1RT0848)作者简介：杨德英(1982一)，女，四川冕宁人，博