新疆多民族族健康人群enos基因g894t多态性分析

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1、新疆多民族族健康人群eNOS基因G894T多态性分析eNOS是心血管系统中合成NO的主分钟，变性95~C30秒，退火66℃30秒，江雪萍要酶。eNOS基因第7外显子第78位碱延伸72℃30秒，共37个循环，最后72℃833200新疆农七师疾控中心基即编码序列第894位碱基发生G突变延伸5分钟。扩增后的PCR产物为为T(G894T)，导致第298位氨基酸残基248bp，经2．5％琼脂糖凝胶电泳，EB染发生谷氨酸被天门冬氨酸代替色，100V，30分钟，置凝胶成像仪上观察(GIu298Asp)。GIu298Asp变异与冠心病特异性条带，打印并记录了实验结果。④基金项目新

2、疆兵团医药卫生科技攻关及急性心肌梗死的发生显著相关⋯。国基因型检测：限制性酶切反应体系101~1，计划课题(20o6GG56)内有关多民族健康人群eNOS基因多态包括PCR产物8．41xl、10×buffer1txl、Ba摘要目的：研究新疆哈萨克族、土尔性的研究鲜见系统报封。本研究旨在了II内切酶(大连宝提供)0．61xl，37~C酶切扈特蒙古族、汉族、维吾尔族健康人群内解新疆哈萨克族、土尔扈特蒙古族、汉族、2小时终止。酶切产物经2．5％琼脂糖凝皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因G894T维吾尔族健康人群内皮型一氧化氮合成胶电泳，凝胶成像仪成像，观察基因型。多态性

3、分布。方法：采用聚合酶链反应一酶(eNOS)基因G894T多态性分布情况。统计学方法：分别计算出新疆哈萨克限制性片段长度多态性分析(PCR—族、土尔扈特蒙古族、汉族、维吾尔族健康RFLP)的方法，分别对新疆哈萨克族、维资料与方法人群基因型频率和等位基因频率，经过吾尔族、土尔扈特蒙古族、汉族健康人群一般资料：新疆地区哈萨克族无血缘HardyWeinberg遗传平衡定律检验，表明作eNOS基因G894T多态性检测，分类计关系、健康体检者7O例，男31例，女39各基因型频率已达遗传平衡，具有群体代数进行统计学处理。结果：新疆哈萨克例，平均年龄39．8±6．4岁；汉族91

4、例，表性。各组间频率比较用检验及Io．族、维吾尔族、土尔扈特蒙古族、汉族健康男44例，女47例，平均年龄43．1±10．8gistic回归分析。P<0．05为差异有统计人群eNOS基因GG、GT、町基因型频率岁；吐尔扈特蒙古族87例，男46例，女41学意义。(P>0．005)及G、T等位基因频率(P>例，平均年龄47．5-l-8．9岁；维吾尔族820．005)。结论：eNOS基因G894T多态性例，男46例，女36例，平均年龄41．6±结果分布种族之间没有显著性差异，种族内等6．1岁。4组测试者肺、肾、肝功能正常，电泳结果：G等位基因存在BanlI酶位基因型频率分

5、布男女间差异无显著性无心、脑血管病、内分泌病史和高血压病切位点，而T等位基因没有BanII酶切位(P>0．05)。史(按WHO标准，收缩压，≤140mmHg；点。因此GG基因型酶切产物为163bp关键词内皮型一氧化氮合成酶基因舒张压~90mmHg。研究对象均自肘静脉和85bp，GT基因型具有248bp和163bp，多民族多态性采血3ml加0．5mlACD抗凝，充分混匀后rITI’基因型酶切产物为248bp。见图1，doi：10．3969／j．issn．1007—614x．2010．放入一20~C冰箱冷藏室保存待检。图2。22．205主要仪器：Mastercycle

6、rReppendorfPCR仪(梯度核酸扩增仪)，购自上海艾AbstractObjective：TostudytheeNOSgene本德生物技术国际贸易有限公司；2．5％relatedtopolymorphismofG894TinHan，琼脂糖凝胶电泳EB染色、上海生物工程Mongolian，UygerandHasakenationality．In有限公司试剂盒。UVPAC暗箱+GEL图l汉族eNOS基因PCR产物及Xingiang．Method：Topolymerizedchainre—相机凝胶成像仪，购白天美有限公司。经BanII酶切后琼脂糖凝胶电泳actio

7、n——restrictionfragmentlengthpolymor·-DNA的提取：低渗溶血法破红细胞，注：M为Marker标记物；1—6为PCR扩增phism(PCR—RFLP)inhealthysubjectsof采用蛋白酶K消化，饱和酚／氯仿抽提法产物；2⋯56为GG基因型；3、4、为GT基因型；Han，Mongolian，UygerandHasakenational-提取白细胞基因组DNA，最后加TE溶解1、为rr基因型。ityinXinjiang．theclassifiedandcounteredDNA，一20℃下放置，检测时BioRad紫外resu

8、ltswe