万应茶微生物限度检查法方法验证

《万应茶微生物限度检查法方法验证》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、StraitPharmaceuticalJournalVol22No．92010万应茶微生物限度检查法方法验证游伟平，曹小明(福建龙岩药品检验所龙岩364000)摘要：目的建立万应茶的微生物限度检查方法。方法按<中国药典)2005年版一部要求，接种5种阳性菌株。采用常规法、培养基稀释法对万应茶进行微生物限度检查方法验证。通过回收率试验测定药物的抑菌性。结果采用常规法检验万应茶，大肠埃希菌、枯草芽抱杆菌、白色念珠菌、黑曲霉的回收率均高于70％，金黄色葡萄球菌的回收率低于70％，采用培养基稀释法检验万应茶，5种菌的回收率均高于7

2、0％；控制菌检查可采用常规法进行检查。结论对万应茶进行微生物限度检查，细菌数测定采用培养基稀释法检查，霉菌及酵母菌数测定采用常规法检查。控制菌大肠埃希菌和大肠菌群检查采用常规法。关键词：万应茶；微生物限度检查；方法验证中图分类号：R927．2文献标识码：A文章编号：1006。3765(20lo】．09．006502万应茶的成分有大黄、木香、豆蔻、陈皮、山楂等34味中疏松的无菌棉花的无菌吸管)至无菌试管内，用0．9％无菌氯药材，主要用于外感风寒，食积腹痛，呕吐泄泻，胸满腹胀的治化钠溶液制成每1mL含孢子数50-100cfu的孢

3、子悬液，作为疗。按照<中国药典)2005年版一部的要求，通过接种5种阳试验菌计数备用。性菌株。采用常规法、培养基稀释法常规法进行实验，为万应2．2供试液制备取供试品10g，加入pH7．0无菌氯化钠一蛋茶建立了微生物限度检查方法。白胨缓冲液lOOmL，用匀浆仪2000r·minI1混匀10min，作为1仪器与材料1：10的供试液。1．1仪器HTYHOMO761型匀浆仪，杭州高得医疗器械2．3回收率测定有限公司；METERTOLEIX)PL1502．S电子天平；ABSC-13602．3．1常规法测定：①试验组：取1：10供试液1

4、mL、5O～I／A2型生物安全柜，北京东联哈尔仪器制造有限公司。100cfu·mL试验菌分别注入平皿中，立即倾注15～20mL琼1．2样品万应茶(永定采善堂制药有限公司，批号090403)。脂培养基，摇匀．按平皿法测定其菌数。②菌液组：测定所加1．3培养基营养琼脂培养基(批号081210)，营养肉汤培养的试验菌数。取50～100cfu·mLI1试验菌注入平皿中，立即基(批号060117)，玫瑰红钠琼脂培养基(批号070329)，改良倾注15～20mL琼脂培养基，摇匀，每株试验菌平行制备2个马丁培养基(批号0810203)，改

5、良马丁琼脂培养基(批号平皿，按平皿法测定其菌数。③供试品对照组：取1：10供试081127)，pH7．0氯化钠一蛋白胨缓冲液(批号080925)。胆盐乳液lmL注入平皿中，分别倾注15～20mL琼脂培养基，摇匀，糖培养基(BL)(批号060613)，4一甲基伞形酮葡糖苷酸培养基按菌落计数方法测定供试品本底菌数。(MuG)(批号070309)，胆盐乳糖发酵培养基(批号060613)，2．3．2培养基稀释法：①试验组：取1：10的供试液1mL，分生产厂家均为北京三药科技开发公司。别注入5个平皿中，每皿0．2mL；再分别加入试验菌

6、液1mL，1．4菌种大肠埃希菌(Escheriehiacoli)[CMCC(B)44102]、每皿0．2mL，立刻倾注相应的培养基，按平皿法测定菌数。金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)[CMCC(B)26003]、枯②菌液组：测定所加的试验菌数。取50～100cfu·mL试验草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)[CMCC(B)63501]、白色念珠菌菌注入平皿中，立即倾注15～20mL琼脂培养基，摇匀，每株(Candidaalbicans)[CMCC(F)98001]、黑曲霉(Azpergi

7、llus试验菌平行制备2个平皿，按平皿法测定其菌数。③供试品niger)[CMCC(F)98003](中国药品生物制品检定所)。对照组：取l：10供试液lmL分别注入5个平皿中，每皿2试验方法0．2mL，分别倾注15～20mL琼脂培养基，摇匀，按菌落计数按(ee国药典>2005年版一部附录XⅢc微生物限度检方法测定供试品本底菌数。查法⋯进行试验。2．3．3培养：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌用2．1菌液制备取经30～35℃培养24h的大肠埃希菌、金黄营养琼脂培养基30～35℃培养48h；白色念珠菌用玫瑰红钠色葡萄球

8、菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤培养物用0．9％无菌琼脂培养基23～28℃培养72h；黑曲霉用玫瑰红钠琼脂培养氯化钠溶液制成每1mL中含菌数5O～100cfu的菌悬液，作为基23～28℃培养5d。逐日点计菌落数。试验菌计数备用；取经23～28℃培养24h的白色念珠菌的改2．4回收率的计算按如下公