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1、PDA培养基马铃薯去皮200g,切成小块，加水煮烂，纱布过滤，加入15g葡萄糖加热，加琼脂20g,继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，搅拌均匀，稍冷却后补纯水定容至1000mL,121°C高压灭菌20min,室温保存。0.5MTris-CI(PH8.0)mL浓盐酸，待溶液冷却至室加纯水定容至500mL,Tris30.25g,纯水400mL,先加入8温后再缓慢加入浓盐酸直至PH值到8.0,高压灭菌20min,4°C保存。0.5MTris-CI(PH7.0)Tris30.25g,纯水400mL,浓盐酸2
2、0mL,冷却至室温后缓慢加入浓盐酸调节PH值到7.0,加纯水定容到500mL,121°C高压灭菌20min,4°C保存。0.5MEDTA(PH8.0)EDTANa2・2H2093.06g,纯水400mL,NaOH10g,再用NaOH溶液缓慢调节PH值到8.0,加纯水定容至500mL,121°C高压灭菌20min,4°C保存。TE缓冲液配方0.5MTris-CI(PH8.0)10mL,0.5MEDTA(PH8.0)1mL,加纯水定容至500mL,121°C高压灭菌20min,4°C保存。CTAB抽提
3、液CTAB20g,0.5MTris-CI(PH8.0)200mL,0.5MEDTA(PH8.0)40mL,NaCl81.8g,加纯水定容至1L,121°C高压灭菌20min,室温保存。醋酸钠(PH5.2)NaAc-3H2040.8g,纯水70mL,溶解后加入冰醋酸调节pH值至5.2,加纯水定容至100mL,121°C高压灭菌20min,4°C保存。RNase(10mg/mI)配方RNA100mg,TE10mL,沸水浴20min,分装于2mL离心管-20°C保存。TB3培养基3g,蔗糖200g,补纯
4、水定容至1L,YeastExtract3g,酸水解酪蛋白高压灭菌20min,4°C保存。STCbuffer蔗糖100g,0.5MTris-CI(PH8.0)50mL,CaCI2・2H203.6755g,补纯水定容至500mL,121°C高压灭菌20min,4°C保存。PTCPEG800040g,补STC溶液到100mL,溶解后用细菌过滤器除菌过滤，4°C保存。1.2MKCI溶液称量KCI固体89.46g并补水到1L,溶解后121°C高压灭菌20min,4°C保存。BottomAgar和TopAga
5、r液崩3解取养酶称培YeastExtract3g,酸水解酪蛋白3g,蔗糖200g,补水到1L,BottomAgar和TopAgar加入琼脂的量分别为10g/L和15g/L,121°C高压灭菌20min室温保存。5g,溶壁酶0.1g,20mL1.2mol/LKCI,30°C,90rpm震荡离心3500rpm,10min,用细菌过滤器过滤，4°C保存。2.5MHCI86.2mLHCI,用超纯水定容至400mLo变性液NaCl87.6g,NaOH20g,加超纯水定容至1000mL,121°C灭菌20mi
6、n。中和液(pH7.6)Tris60.57g,NaCl87.6g,加入约800mL的超纯水，用浓HCI调节pH至7.6,加超纯水定容至1000mL,121°C灭菌20mino20XSSC(pH7.0)二水合柠檬酸钠88.2g,NaCl175.3g,加入约800mL的超纯水，用浓HCI调节pH至7.6,加超纯水定容至1000mL,121°C灭菌20mino转膜时需要用超纯水稀释成WXSSCo5XSSC量取250mL20XSSC,用超纯水定容至1000mL。0.5XSSC,0.1%SDS量取100mL
7、5XSSC,用超纯水定容至1000mL,然后加入0.5gSDS,充分混匀。杂交缓冲液将64mL超纯水分两次缓慢加入地高辛杂交颗粒(7号瓶)中，在37°C条件下搅拌至缓冲液完全澄清。马来酸缓冲液称取马来酸11.6g,NaCl8.76g,加入800mL纯水中，用Na0H(固体)调节pH至7.5(20°C),定容至1000mL,121°C灭菌20min。洗涤缓冲液称取马来酸11.6g,NaCl8.76g,加入800mL纯水中，用NaOH(固体)调节pH至7.5(20°C),然后加入3mLTween20,
8、定容至1000mL,121°C灭检测缓冲液称取NaCl5.844g,Tris12.114g,溶解于800mL纯水中，用2.5MHCI调节pH至9.5(20°C),定容至1000mL,121°C灭菌20min。封阻溶液用1:10的比例用马来酸缓冲液将10X封阻液(6号管)稀释成1X工作溶液。抗体溶液每次使用之前将原始管中的anti-digoxigenin-AP(4号管)1000rpm离心3min,从表面小心吸取所需用量，用封阻液按1:5000(150mU/mL)的比例稀释。YPDYe
