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时间:2020-07-12
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1、常用试剂配方常用试剂储存注意事项:储存于阴凉、通风的地方;远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃,相对湿度不超过80%。包装必须密封,切勿受潮。应与易(可)燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放,切忌混储,储区应备有合适的材料收容泄漏物。操作注意事项:尽量在通风橱操作,加强通风,避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物,避免与还原剂、碱类、醇类接触,防止包装及容器损坏。使用后应留意剩余量,注意及时订购。8MUrea(尿素)组份浓度:8mol/LUrea(MW:60.07)配制量:1L配制方法:1.
2、称取尿素480g,置于1L的蓝盖瓶中。2.加水至1L,置于磁力搅拌器上充分搅拌。3.于棕色瓶中,4℃保存。 4.使用前,先在常温放置,使析出的尿素溶解。0.25%AgNO3(硝酸银)组份浓度:0.25%(W/V)AgNO3(MW:169.87)配制量:500ml配制方法:1.准确称取硝酸银1.25g。2.加入500ml的去离子水,充分溶解。3.于棕色瓶中,常温保存。0.5MEDTA(PH8.0)组分浓度:0.5mol/LEDTA(MW:372.24)配制量:500ml配制方法:1.称取93gNa2
3、EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。2.加入400ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。3.用NaOH调节调节pH值至8.0(约需加入20g固体NaOH),当pH接近8.0时,EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。4.高温高压灭菌后,室温保存半年。5MNaCl组份浓度:5mol/LNaCl(MW:58.5)配制量:1L配制方法:1.准确称取氯化钠292.5g,置于1L的蓝盖瓶中。2.用去离子水溶解并稀释至1L。3.高温高压灭菌后,常温保存。50%甘油组分浓度:50%(V/V)gl
4、ycerol配制量:100ml配制方法:1.量取下列试剂,置于250ml蓝盖瓶中:100%glycerol50ml2.加入50ml去离子水,充分搅拌溶解。3.高温高压灭菌,4℃保存。4.使用时,到超净台分装。2MCaCl2组份浓度:2mol/LCaCl2(MW:110.98)配制量:50ml配制方法:1.准确称取氯化钙4.4g于50ml的conicaltube中。2.用去离子水溶解并稀释至500ml,用0.22μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conicaltube。3.贮存于4℃。2MMgSO
5、4组份浓度:2mol/LMgSO4(MW:120.37)配制量:50ml配制方法:1.准确称取硫酸镁4.8g于50ml的conicaltube中。2.用去离子水溶解并稀释至50ml,用0.22μm滤膜过滤除菌到进口的conicaltube。3.贮存于4℃3MNaOAc (pH5.2) 组份浓度:3mol/LCH3COONa(MW:136)配制量:100mL配制方法:1.称取40.8gNaOAc•3H2O置于200mL蓝盖瓶中,2.加入约40mL的去离子水搅拌溶解3.加入冰乙酸调节pH
6、值至5.2。4.加入去离子水将溶液定容至100mL。5.高温高压灭菌后,室温保存。3MKOAc组份浓度:3mol/LCH3COOK(MW:98)配制量:100mL配制方法:在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml;水,即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。1MNa2SO4组份浓度:1mol/L(MW:142.04)配制量:500mL配制方法:1.称取71.02g置于500mL蓝盖瓶中,2.加入去离子水将溶液定容至500mL。3.室温保存。HEPE
7、S1MHEPES:配制量:100mL配制方法:1、将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。2、如不想加入OH-,可以配200mlHEPES和200mlHEPESsodiumsalt,将HEPESsodiumsalt加入200mlHEPES调至所需PH。注意:一般长晶体用的HEPES需用后一种方法配制,配一般buffer则可用第一种方法配。50%PEG(聚乙二醇)有分子量400,1000,2000,4000,6000,10000配制量
8、:500mL配制方法:称取250gPEG加入500ml蓝盖瓶,加水至500ml,置于磁力搅拌器上充分搅拌,完全溶解后,用NALGENE过滤器抽滤,抽滤后用50ml灭菌离心管分装,存放在-20℃底层。20%Glucose(葡萄糖)组份浓度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.称取20gGlucose置于150ml的广口试剂杯中,加入去离子水到100ml后,搅拌溶解。2.高温高压灭菌后,4C保存。100mMATP组份浓度:100mMATP配制量:20ml配制方
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