白藜芦醇对宫颈癌细胞株Hela增殖的影响【大学临床医学毕业论文设计，精选】.doc

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1、临床医学论文•白藜芦醇对宫颈癌细胞株Hela增殖的影响【摘耍】目的硏究白藜芦醇诱导宫颈癌细胞株Hela的细胞生长和发育的改变，细胞周期的进行和凋11等。方法MTT法测定白藜芦醇对Held细胞的作用。3H-TdR掺入法检测白藜芦醇对Hela细胞DNA合成的影响。流式细胞术分析细胞周期。结果白藜芦醇作用后，Hein细胞的增殖速度减缓，DNA合成减少。白藜芦醇在较低浓度时即可诱导较快的可逆的S期停滞。结论合适浓度的白藜芦醇可有效预防早期肿瘤，但不至于引起细胞毒作用和细胞死亡。【关键词】白藜芦醇；细胞周期；宫颈癌；Hela细胞AB

2、STRACT-ObjectiveTostudytheeffectsofResveratrolonthegrowth,development,cel1cycleandapoptosisofcervicalcancereel1sHelacells・MethodsMeasuretheeffectsofResveratrolonHelacellsbyMTT・DetecttheinfluenceofResveratrolonDNAsynthesisofHelacel1sthrough3HTdRinfiltrationmethods・

3、Analyzecel1cyclebyf1owcytometry.RusultsAfterthetreatmentwithResveratrol,Hclacellsprolifcratcmoreslowly.ThesynthesisofDNAdecreases.ResveratrolatlowconcentrationcaninducefastandreversibleblockageatphaseSbyf1owcytometryassay.ConclusionSuitableconcentrationofresveratr

4、olcouldffeetivelypreventtumorinearlystagewithoutcytotoxicorcytonecroticsideeffect.KEYWORDS:Resveratrol;Cellcycle»Cervicalcancer;Helacells物，在我们日常的食物中均有存在，如：葡萄、花生和红酒等［1］。有硏究显示它有多种生物学效应，包括保护心血管、抗癌、延年益寿等。已有实验室硏究发现白藜芦醇能增加酵母、后生动物和其它实验室动物的寿命［2］。但是，冃前其发挥作用的相关细胞学和分子生物学机制尙未

5、完全明了。近来的机理学硏究显示肿瘤的发生是一个长期的过程，它与各种细胞周期中的事件密切相关，包括细胞凋亡的启动和执行等等。采用化学约物来抑制细胞周期的进行或干扰肿瘤细胞的生长，增殖诱导其细胞凋亡等治疗策略渐渐被人们所接受［3］。我们在硏究中，检测了白藜芦醇对人宫颈癌细胞株HcM的细胞增殖和生存，细胞周期的进行、凋亡等的影响。1材料与方法1.1试剂和仪器白藜芦醇(化学纯)、MTT、DMS0、SDS，碘化丙U定(PI)、RNaseA均购自上海申氏化工。RPMI1640液体培养基和小牛血清购自晶美公司。流式细胞仪(COULTER

6、XL;Coulter)；酶标仪(GENIOSTECAN)；B液闪仪(MicroBetaTrilux,PerkinElmerLifeSciences)01.2细胞培养人宫颈癌细胞株Held购自美国典型菌种收藏所(ATCC,Manassas,VA)RPMI1640培养基加10%小牛血清‘培养于37°C含5%C02细胞培养箱。1.3细胞活力及成长测定MTT法测定白藜芦醇对Hela细胞的作用［4］。即：将细胞以密度为1x104/孔接种于96孔板，培养12h后，加入不同浓度的白藜芦醇(12.5〜100“M)继续培养。设立空白对照。细

7、胞培养12h、24h、36h后加入MTT(5mg/ml)继续培养4h，加100［i1DMSO，平板震荡仪上震荡5min°酶标仪上波长560nm测定0D値。1.4DNA合成测定Hela细胞1x104/孔接种于96孔板，培养12h后，加入不同浓度的白藜芦醇(12.5〜100//M)继续培养。细胞中加入3HTdR0.5〜1.0/zCi/fL'继续培养6h，然后收获细胞于玻璃纤维滤纸上［5］。烤干后，将滤纸放入闪烁杯中，每杯加闪烁液5ml，/3液闪仪测定各管cpm。1.5流式细胞仪分析细胞周期Hela细胞培养于6孔板一定时间，加入

8、或不加白藜芦醇。培养不同时间后收获细胞用PBS洗，混于冷的70%乙醇中4°C过夜。然后细胞用冷PBS洗，再用PI/RNaseA溶液37°C孵育20min»上机分析［6］。1.6统计学分析数据用SPSS10.0软件处理，计量资料用均数士标准差(士s)表示，检验用于检测组间差异。P<0.05为具有统计学意义