舟山眼镜蛇毒抗肿瘤有效组分分离及其抑瘤作用研究初探

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1、蛇志JournalofSNAKE(Science&NAtureareKEytohealth)2010年第2z卷第3期Vo1．22No．3，2010舟山眼镜蛇毒抗肿瘤有效组分分离及其抑瘤作用研究初探陈劲海，孔天翰(1_广州医学院第一附属医院耳鼻咽喉一头颈外科，广东广州510120f2．广州医学院病理生理学教研室，广东广州510182)[摘要]目的从舟山眼镜蛇(Najaat：raCantor)蛇毒(snakevenom，SV)中分离得蛇毒组分，探讨SV及其分离组分的LDs。和抑制肿瘤的作用。方法采用凝胶柱层析方法从蛇毒中分离

2、得到了前I1、I1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2及Ⅳ等7种组分。采用急性毒性实验、MTT法，研究SV及其7种SV分离组分的LD5o和抑制肿瘤的作用。结果SV经SephadexG-50层析，可分离为前I、I、Ⅱ、Ⅲ及IV5个组分，根据峰面积大小排列Ⅲ>Ⅱ>I>Ⅳ>前I。5个组分再经SephadexG-25柱层析，可获得7个脱盐组分：前I1、I1、lI1、II2、Ⅲ1、Ⅲ2及Ⅳ。通过急性毒性实验，明确Ⅳ的毒性最大，其次为Ⅲ2及Ⅲ1，三者的LD5o值均低于SV}而I1、lI1、Ⅱ2的毒性均小于SV。前I1几乎无毒。SV组分Ⅲ2和Ⅳ的

3、抑瘤作用最强，在高浓度(20／~g／rn1)时对实验中的2种人肿瘤细胞的抑制率均达到6O以上。结论从SV中分离得到了前I1、I1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、llI2以及Ⅳ7种组分}组分Ⅳ毒性最强，依次为Ⅲ2>mI>SV>Ⅱ2>Ⅱ1>I1>前I1；SV及其7种分离组分对2种人肿瘤细胞株(SoC-7901、A549)的生长抑制有一定的特异性，而不同的SV分离组分对同一肿瘤细胞抑制作用亦有差异。[关键词]舟山眼镜蛇f蛇毒f毒素f肿瘤[中图分类号]R996．3[文献标识码]A[文章编号]1001—5639(2010)03—0193一O5

4、doi：10．3969／j．issn．1OOl——5639．2010．0：3．001Experimentalstudiesontumor-inhibitingeffectsoffractionatajaatraCantorCHENJing—hai．KONGTian-han(1．DepartmentofOtorhinolaryngology-Head&NeckSurgury，TheFirstAffliatedHospitalofGuangzhouMedicalCollege，Guangzhou，Guangdong，5101

5、20，China~2．DepartmentofPathophysiology，GuangzhouMedicalUniversity，Guangzhou，Guangdong，510182，China)Abstract：ObjectiveSomefractionswereisolatedfromsnakevenomofNajaatraCantorbyusinggelcolumnchromatography．Studiesontumor-inhibitingeffectsoffractionatedcompo—nentsfro

6、msnakevenom．MethodsAcutetoxicityofthesefractionswasdetectedbyusingmouseacutetoxicitytest．Theantitumoreffectsofsnakevenomfractionswerefurtherob—servedinthisexperiment．ByusingMTTtest．ResultsFivefractions，includingFrontI1，I1，Ⅱ，IIandIVwereisolatedfromsnakevenomofNaja

7、atraCantorbyusingSephadexG-5Ogelcolumnchromatography．TwofractionswereisolatedfromⅡor1IrespectivelybyU—singSephadexG-25gelcolumnchromatographyfordesalinization．AccordingtothevaluesofLDso，thetoxicityofIVismaximuminseveninitialfractions，andthenfollowingbyⅢ2>1I1>SV>Ⅱ

8、2>II1>I1>FrontI1．Snakevenomfractionsm2andInitial1Vpossessstrongesttumorinhibitingeffect，inhibitingrateof6kindsofhumantumorcellswasmorethan6Owhentheirconcentrat