板栗花中β-半乳糖苷酶活性的研究

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1、板栗花中p一半乳糖苷酶活性的研究唐烨苏琪张萍珍(圣元营养食品有限公司北京营养研究院)摘要：以12种板栗花为试验材料，采用磷酸缓冲溶液提取13一光度计。半乳糖苷酶并用分光光度计测定其活性，并测定了“燕胜”品种板栗2试验方法花中的13一半乳糖苷酶的性质。探知所有品种的板栗花的13一半2．113一半乳糖苷酶的提取提取方法：取1g花瓣样乳糖苷酶活性在采花后的前9天都呈现先减小后增大的趋势。燕胜品，用剪刀剪成小碎片后，置于研钵中；再向研钵中加入板栗花中的13一半乳糖苷酶活性最适温度为4O℃，最适pH值为10ml磷酸盐缓冲溶液

2、，将样品研磨成匀浆，12000r／min离5。关键词：板栗花13一半乳糖苷酶活性性质心20min：收集上清液即为粗酶液。板栗花(Chinesechestnutflowers)为壳斗科(Fagceae)2_2试验溶液的配制配制方法：DH值为5．0的栗属植物栗(CastaneamollissimaBlume)的雄性花序。0．1mol／L的磷酸缓冲液：将120ml的0．1mol／L的柠檬酸板栗是雌雄异花同株果树，板栗花期为5～6月，果熟期溶液与130ml的0．2mol／L的磷酸氢二钠溶液混合于为9～10月。一般雌花少，雄

3、花多，同一植株的雌雄花比25OmI的容量瓶中，即得目标溶液。达1：2349，为了提高板栗的产量，常需要疏除雄花，疏雄2．313一半乳糖苷酶活性的测定取5mmol／L的后只保留树冠边缘部分5％～10％的雄花序，足够授粉所ONPG溶液2ml置于试管中，并在30。C水浴锅中预热3分需。钟：然后向试管中加入1ml粗酶液，迅速立即计时，在30℃1材料与仪器下反应10min：在上述条件下，A每变化0．001个单位所需1．1试验材料板栗花：品种为“青龙后擦岭2号”、“燕的酶量定义为1个酶活力单位。龙”、“小粒”、“Q23”、“青

4、龙早熟2号”、“下河西6号”、“苇酶活力(U)=A×1000，式中A：反应前后测定的吸光子峪”、“大青杆”。率之差。1．2试验试剂及器皿柠檬酸(分析纯)、磷酸氢二钠3结果与分析(分析纯)：试管、试管架、试管夹、移液管、胶头吸管、烧杯、3．1不同板栗花品种中13一半乳糖苷酶在不同储存玻璃棒、标签。期间的活性本次试验分别在采花后第1、3、5、7、9天对各1．3试验仪器RJ—TDL一5A低速台式大容量离心机、品种板栗花进行样品处理和酶活性测定，五次试验结果列HH—S数显恒温水浴锅、电子天平、SP一723型可见光分光入表1

5、。(上接第291页)的胶体。5实验总结经过这项技术试验，我个人得到了不少的收获，一方面加深了我对大豆分离蛋白功能性的认识，另一方面也提高了电脑软件的应用能力。这项试验跟我以前做的试验不同，以前是依据标；隹来做，这次是在日本大豆蛋白专家的指导下，亲自动手，开动脑筋，结合自己的试验经验，经过反复试验形成了本次实验方法，并纳入我们实验室的作业指导书中，作为化验室的检验依据，所以我觉得这项试验在较高的温度下加热凝胶体，随盐水浓度的增加，蛋最宝贵，最深刻。白凝胶的硬度和咀嚼性先增加后减小，直到无法形成凝在本次试验中遇到的困难

6、是胶体的制备。由于产品的胶。其原因是在盐浓度较低时，蛋白表现为易于溶解，称为质量不完全一致，就是同样的样品量放置在同样的器具中，盐溶现象：在盐浓度较高时，蛋白质会出现沉淀现象，称为制备的胶体高低也不一样，经过切割表面不光滑，这样测得盐析现象。的数据代表性很差，在这种情况下，我们发明了不锈钢模4方法说明具，并申请了专利，解决了这一难题。所以我们做实验不要4．1方法中使用2．5％的盐水制备胶体更接近用户的一成不变和墨守成规，应该有改良创新的精神。在试验的过生产工艺，使测定数据更有意义。程中要培养自己的独立分析问题和解决

7、问题的能力。4_2方法中使用模具制备的样品胶体，大小、高度一参考文献：致及表面平整光滑，减少了样品胶体不一致产生的误差。【1】邢小鹏，吴高峻，孙华．大豆分离蛋白的功能特性【J】，食品工业使用肠衣和离心杯都得不到高度一致的胶体，如果进行切科技，2000(04)．割，表面也不平整。【2】王欣，乔玲．大豆分离蛋白的营养、功能特性及应用研究【J】．4．3方法中使用抽真空的方法，使制备胶体时在搅拌农业科技与装备，2013(05)．过程中产生的气泡脱出，降低测试误差。如果使用离心的【3】慈峰，曹雁平，许朵霞，王蓓．木瓜蛋白酶改

8、性对大豆分离蛋白方法，凝胶性差的样品容易出现析水现象，无法得到均匀乳化性能的影响【J】．食品与发酵工业，2013(01)．292表1不同时期不同品种板栗花中B一半乳糖苷酶的活性由图2可知，B一半乳糖苷酶活性先随品种采后第1天采后第3天采后第5天采后第7天采后第9天pH的增大而增大，在pH=5时达到最大，酶活青龙后擦岭2号762428227189260性数值在