板栗蛋白质的分离鉴定及活性研究

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1、萄菇大簧硕士学位论文板栗蛋白质的分离鉴定及活性研究StudyontheseparationidentificationandactivityofProteinisolatedfromthefrUitofCastaneamollissimaBlumeOIIiSSiae2012年1月指导教师(姓名、职称)：送鹤蚕副熬拯摘要目的：探讨板栗中蛋白质的分离纯化及其促肾细胞生长作用和抗肿瘤作用及机制。方法：从板栗中提取的水溶性蛋白质，经鉴定是欧栗球蛋白(CAS)。利用MTT法检测该蛋白对正常肾细胞和肝癌细胞Hep．S，小鼠肉瘤S．180腹水型肿瘤细胞增殖的影响；检验其对小鼠T细胞和B细胞增殖作用的影响

2、；用DNA电泳方法检测该蛋白诱导Hep．S细胞凋亡的作用；建立荷瘤小鼠模型和免疫低下模型验证体外细胞实验结果。结果：CAS在体外对正常肾细胞的增值有促进作用，对试验的肿瘤细胞的增值均有抑制作用，对T细胞和B细胞的增值有促进作用，对Hep．S细胞具有诱导凋亡的作用；在荷瘤小鼠模型中，能够提高抑瘤率和脾脏指数；在免疫低下模型中能够提高脾脏重量并且提高脾淋巴细胞的增值。结论：CAS具有促肾细胞生长和抗肿瘤作用，其抗肿瘤作用机制可能通过提高机体免疫力和诱导细胞凋亡来实现。【关键词】：欧栗球蛋白；分离纯化；肾细胞增殖；抗肿瘤；细胞凋亡；免疫；抑瘤率；脾指数和胸腺指数；环磷酰胺THESIS：Study

3、ontheseparationidentificationandactivityofProteinisolatedfromthefruitofCastaneamowssimaBlumeSSiSPECIALIZATION：PharmaceuticalengineeringPOSTGRADUATE：Yan．LiMENTOR：HeyunZhang(AssociateProfessor)AbstractPurpose：TostudyisolateandidentifytheproteinfromthefruitofCastaneamollissimaBlumeandtodeterminetheir

4、protectionforkidneyandanti—tumoreffectaswellasitsmechanismofaction．Methods：TheproteinfromextractofCastaneamollissimaBlumewasidentifiedcastanin(CAS)．TheeffectsofCASonproliferationofmousehepatomacellsHepS，S一180mousesarcomaascitestumorcells，mousenormalrenalcells，thymuscellsandspleencellswasdetectedby

5、MTTcolorimetricassay．AlsothefunctionofCASonapoptosisofmousehepatomacellsHepSwasexanimatedbyDNAagarosegelelectrophoresis．Theexperimentsonanimalcellsinvitroareverifiedbyusingbearing—·tumormiceandcyclophamide·-immunodepressedmodelinmice．Results：CAScaninhibittheproliferationofthesetumorcells，andalsoca

6、nsignificantlypromotegrowthofnormalrenalcells，thymuscellsandspleencells，whilecaninducedapoptosisofhepatomacellsHep-S．Thetumorinhibitionrateandspleenindexbothareincreasedinbearing—tumormice，alsoitcanpreventthedecineofspleenweightandimprovespleniclymphocytecellmultiplicationability．Conclusion：CAShav

7、esignificantlypromotinggrowthofrenalcellsandanti—tumoreffects．Themechanismofanti．tumoreffectsofCASmightberelatedtotheincreasedimmunityfunctionofmiceandinducedapoptosis．Keywords：castanin；isolationandcharacterizati