粘细菌分离鉴定及活性分析

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1、摘要粘细菌是一类革兰氏染色为阴性的单细胞细菌，具有复杂的多细胞行为，可以滑行运动，能产生多细胞的子实体和抗逆性强的粘孢子。其代谢产物具有丰富，多样，新颖的生物活性，是筛选天然药物的良好资源，具有很大的研究开发价值。本文分别以兔粪法法和滤纸法对内蒙古部分地区采集的土壤样品进行粘细菌的分离，对分离的粘细菌进行子实体和菌落的形态观察、生理生化特征检测及分子鉴定，以确定这些菌株的真实分类地位。通过序列分析构建系统发育树，阐明所得粘细菌种属间的亲缘关系，并对分离的粘细菌菌株进行抗细菌和抗真菌的活性分析。本次

2、研究共分离出67株细菌，其中66株具有粘细菌的形态特征，子实体颜色鲜艳，菌落形态各异。结合直接纯化与抗生素法纯化得到35株纯的粘细菌，经鉴定这些粘细菌菌株分属粘细菌的6个属，即：粘球菌属16株；珊瑚球菌属10株；原囊菌属3株；孢囊杆菌属2株；囊球菌属2株；纤维堆囊菌属2株。经16SrDNA序列分析可知，所有分离的粘细菌菌株与已知菌株的最高序列同源性均在98%以上。此外，本次实验获得1株细菌wt-4，其菌落形态不同于粘细菌，经16SrDNA序列分析，发现这株细菌与鞘脂单胞菌(Sphingomonad

3、aceaebacterium)最高序列同源性为94%，有可能为新的属，需要进一步研究鉴定。对分离的粘细菌进行抗细菌与抗真菌活性分析，结果显示：所得的35株粘细菌均表现出一种或多种指示细菌或真菌的抗菌活性，其中有23株粘细菌能抑制大肠杆菌的生长，17株能抑制枯草芽孢杆菌生长，18株粘细菌能抑制金黄色葡萄球菌生长，18株能抑制酿酒酵母的生长，31株粘细菌能抑制马铃薯晚疫病菌的生长，检测的所有粘细菌菌株对核盘菌和黑痣病菌均无明显的抑制作用。该工作的完成为内蒙古地区粘细菌的深入研究及新药研发奠定了基础。关

4、键词：粘细菌；分离；鉴定；抗菌活性IsolationandIdentificationofMyxobacteriaandStudyonItsActivityAbstractMyxobacteriaareaclassofGram-negativebacteriawithcomplexmulticellularbehavior,Theyareunicellularbacteriaandcanglidingmotion.MajorityofMyxobacteriawillformmulticellula

5、rfrutingbodyandmyxospore,andmyxosporehavestrongstressresistance.Theyhavegreatresearchvalueinscreeningnaturaldrugs,becausetheirmetaboliteshaverich,diverseandnovelbiologicalactivities.Inthisstudy,weisolatedmyxobacteriabyrabbitdungpelletsandfilterpaperme

6、thods,thesoilsampleswerefromsomeareasofInnerMongolia.Weidentifiedthestrainsbyfrutingbodyandcolonymorphology,theirphysiologicalandbiochemicalcharacteristic,16SrDNAmolecularmethods.Inordertoelucidatethemyxobacteriainterspeciesrelationship,analyzedsequen

7、ceandconstructedphylogenetictree.Analysisthestrainsofisolatedmyxobacteriaantibacterialandantifungalactivity.Inthisstudy,67strainsofbacteriawereisolated,and66ofthemwiththemorphologicalfeaturesofMyxobacteria,theyhaveFruitingbodieswithbrightcolorsanddiff

8、erentcolonymorphology.obtained35strainsofpurestrainbydirecttransferandantibiotictreatment.Theclassificationandidentificationdisplay:thesestrainsbelongto6generainmyxobacteria:Myxococcus(16strains);Corallococcus(10strains);Archangium(3strains);C