HPLC法同时测定金叶清瘟散中绿原酸和咖啡酸的含量.pdf

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1、·30·中国兽药杂志2014,48(9):30~33/雍燕,等HPLC法同时测定金叶清瘟散中绿原酸和咖啡酸的含量雍燕,方炳虎,刘国昌,吴广辉,黎乃添,时书宁,温子明(1.广东大华农动物保健品股份有限公司,广东云浮527400;2.华南农业大学兽医学院,广州510642)【收稿日期]2014—05—28【文献标识码]A【文章编号]1002—1280(2014)09—0030—04【中图分类号]$853.73[摘要]为了建立一种同时测定金叶清瘟散中绿原酸和咖啡酸的高效液相色谱法,选用AgilentC18色谱柱(250mmX4.6mm,5I

2、xm),乙腈:O.4%磷酸溶液(12:88)等度洗脱,进样量1OL,流速1mlVmin,波长为328nm进行检测。结果显示,被测物质能与样品中杂质有效分离,绿原酸和咖啡酸分别在5.0~500I~g/mL和2.5~250g/mL的范围内呈良好线性关系,两种药物的添加回收率均高于95%,RSD小于2%。该方法简便、快速、准确,适用于金叶清瘟散中绿原酸和咖啡酸的同时检测。[关键词]金叶清瘟散;绿原酸;咖啡酸;高效液相色谱法SimultaneousDeterminationofChlorogenicAcidandCafeicAcidinJin

3、yeQingwenSanbyHPLCYONGYan,FANGBing-hu,LIUGuo-chang,WUGuang—hui,LINai—tian,SHIShu-ning,WENZi-ming(1.GuangdongDahuanongAnimalHealthProductsCo.,Ltd.,y¨,Guangdong527400,China;2.CollegeofVeterinaryMedicine,SouthChinaAgriculturalUnive~i@,Guangzhou510642,China)Abstract:AnewHPL

4、CmethodwasfirstlyestablishedforthesimultaneousdeterminationofchlorogenicacidandcaffeicacidinJinyeQingwenSan.AnalysiswasperformedonaAgilentC18column(250mm~4.6mm,5m)at328nm.Themobilephasewasconsistedofacetonitrileand0.4%phosphoricacidsolution(12:88),theinjecti0nv0lumewas1

5、0LLLandflowratesettedat1mL/min.Resultsshowedthatthemeasuredtwosubstanceshadeffectiveseparationfromothercomponentsinsamples,chlorogenicacidandeafeicacidhadgoodlinearityovertherangeof5.0—500Ixg/rnLand2.5~250g/mL,respectively.Themeanrecoverieswerehigherthan95%andtheRSDallb

6、elow2%.Thismethodwasconvenient,accurateandreliableforthedeterminationofchlorogenicacidandcafeicacidinJinyeQingwenSan.Keywords:JinyeQingwenSan;chlorogenicacid;caffeicacid;HPLC金叶清瘟散是在中兽医理论基础上,经多项研中药制备而成的散剂,具有清热解毒、凉血消斑的究试验.选取金银花、大青叶、蒲公英、连翘等l6味功效.主要用于防治禽类热毒壅盛等症⋯。绿原酸基金项目:广东大

7、华农动物保健品股份有限公司基金项目作者简介:雍燕,硕士,从事新兽药研发及质量检测工作。E—mail:xiaoyner@126.COB2014,48(9):30—33/雍燕,等中国兽药杂志·3l·和咖啡酸分别是金叶清瘟散中金银花和蒲公英的2.3色谱条件及系统适应性试验色谱柱:Agilent主要成分,其含量受原材料来源的不同可呈现较大C18柱(250rnm×4.6mm,5m);流动相:乙腈差别。现行标准对金叶清瘟散中绿原酸和咖啡酸(12%)一0.4%磷酸(88%);流速:1mL/min;检测波的检测方法为薄层色谱法.该方法只能定性检测,长

8、:328nm;进样量:10L。按照上述方法分别分无法准确定量。为了提高金叶清瘟散的质量可控析混合对照品、样品溶液以及阴性样品溶液,色谱性.在参考相关文献资料的基础上[2],本研究建立图见图1一图3。结果表明,在该色谱条件

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