hplc法测定口炎清片中绿原酸含量

《hplc法测定口炎清片中绿原酸含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、HPLC法测定口炎清片中绿原酸含量【摘要】目的建立口炎清片绿原酸含量测定的方法。方法用C��18柱，乙腈-0.4%磷酸溶液（13：87）为流动相，检测波长327nm。结果在0.018~0.090mg/ml范围内呈良好的线性关系（r=0.9986）。平均回收率为99.61%，RSD为1.16%（n=6）。结论方法重复性好，测定结果准确可靠。【关键词】口炎清片；绿原酸；高效液相色谱法AssayofchlorogenicacidinkouyanqingtabletsbyHPLCSONGHai-lang.GuangzhouYon

2、gfutanpharmaceuticalCo.Ltd.，Guangzhou510978，China【Abstract】ObjectiveAmethodwasestablishedfortheassayofChlorogenicacidinKouyanqingtablets.MethodsTheC��18columnwasusedandacetonitrile-0.4%phosphoricacidsolution(13:87)asmobilephase，detectedat327nm.ResultsThelinearran

3、gewas0.018~0.090mg/ml(r=0.9986).Theaveragerecoveryratewas99.61%,RSD1.16%(n=6).ConclusionThemethodisaccurate,reliableandwithgoodrepeatability.【Keywords】Kouyanqingtablets；Chlorogenic5acid；HPLC1仪器与试药1.1仪器ESJ182-4电子天平（沈阳龙腾电子有限公司），LC-10AT液相色谱仪（岛津仪器有限公司），超声波发生器（天津奥特赛斯仪

4、器有限公司），DimensionsC��18色谱柱。1.2试剂与试药绿原酸对照品（批号为：110753-200212由中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，乙腈为色谱纯，水为重蒸水（自制），其他试剂为分析纯。2实验方法与结果2.1色谱条件色谱柱C18硅烷键合硅胶（5μm，4.6×250mm）；流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液（13：87）；流速1.0ml/min；进样量10μl；检测波长327nm。在此条件下，出峰时间适当，色谱峰峰形理想，分离度好，既可以保证样品的测定，也可以排除其他组分的干扰。理论板数按绿原酸峰计算

5、应不低于1000。2.2对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含绿原酸43.2mg的溶液（10℃以下保存），即得。色谱图如图1。2.3供试品溶液的制备取本品装量差异项下样品10片，研细，取0.5g，精密称定，精密加入50%甲醇405ml，放置15min后，振摇，超声处理5min，使完全溶解，用50%甲醇定容至50ml量瓶中，作为供试品溶液。色谱图如图2。2.4阴性对照溶液的制备取按处方比例及制备工艺制备的不含金银花（绿原酸）的阴性对照样品，照2.3项下操作，同法制成阴性对照溶液。2.5空白干扰

6、试验吸取阴性样品10μl进样，观察在样品峰的保留时间处是否有杂质峰。测得结果表明：在样品保留时间处无明显杂质峰干扰。色谱图见图3。2.6线性关系考察分别配制对照品溶液0.018、0.036、0.054、0.072、0.090mg/ml进样10μl，测定，以峰面积积分值为纵坐标，标准品浓度为横坐标绘制标准曲线，计算得到回归方程。见表1。结果表明绿原酸在0.018~0.090mg/ml之间有良好的线性关系。2.7稳定性试验分别取同一份供试品溶液10μl，按上述色谱条件每隔一定时间测定其含量，考察样品溶液的稳定性，计算相对标准

7、偏差，见表2。2.8精密度试验取同一供试品溶液，进样10μl,重复进样6次测定峰面积计算相对标准偏差。见表3。2.9重复性试验精密称取样品6份，制成供试品溶液，按已拟定的色谱条件测定峰面积，计算相对标准偏差。见表4。51.10回收率试验采用加样回收法，取已知含量的口炎清片(050301)10片，研细，取六份该粉末，每份0.26g，精密称定，分别加入绿原酸对照品（0.36mg/ml）4ml。加入50%甲醇40ml，放置15min后，振摇，超声处理5min，使完全溶解，用50%甲醇定容至50ml量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.

8、45μm）滤过，滤液作为供试品溶液。按上述色谱条件测定，以下式计算回收率，结果列于表5。回收率%=（实测绿原酸量-样品中含量）/加入量×100%2.11样品中含量测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl依上述色谱条件测定,计算含量。样品测定结果见表6。经对5批同一生产工艺生产的样品进行含量测定，结果表明，不同