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1、HPLC法测定痔炎消片中绿原酸和芦丁的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法同时测定痔炎消片中绿原酸和芦丁的含量。方法采用DiamonsilC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-0.5%磷酸(20:80),流速:1.0ml/min,检测波长:344nm。结果绿原酸在进样量0.0192~0.48μg呈良好的线性关系;平均加样回收率为99.89%,RSD=0.33%(n=5)。芦丁在进样量为0.096~2.406μg呈良好的线性关系;平均加样回收率为99.73%,RSD=1.49%(n=5)。结论本法操作简便,重现性好,可用作该
2、药品的质量控制。【关键词】痔炎消片绿原酸芦丁HPLC含量测定【Abstract】ObjectiveToestablishaHPLCmethodforthedeterminationofchlorogenicacid,rutininZhiyanxiaotablets.MethodsADiamonsilC18column(250mm×4.6mm,5μm)wasusedwithmobilephaseofacetonitrile-0.5%phosphoricacidsolution(20:80).Theflowratewas1.0ml/minand
3、thedetectionwavelengthwas344nm.ResultsThelinerarityrangeofchlorogenicacidandrutinwere0.0192~0.48μgand0.096~2.406μgrespectively.Theaveragerecoveryratewere99.89%(RSD=0.33%,n=5)and99.73%(RSD=1.49%,n=5).ConclusionThismethodissimple,accurateandcanbeusedforthestandardqualitycont
4、rolofZhiyanxiaotablets.【Keywords】Zhiyanxiaotablet;chlorogenicacid;rutin;HPLC;determination痔炎消片是由火麻仁、紫珠叶、槐花、金银花、地榆、白芍、三七、茅根、茵陈、枳壳十味药材经适当加工制成,具有清热解毒,润肠痛便,止血,止痛,消肿的功效,用于痔疮发炎肿痛等症[1]。在处方组成中,金银花具有清热解毒,凉散风热之功效[2];茵陈具有清湿热,退黄疸之功效[2];槐花具有凉血止血,清肝泻火之功效[2]。本文用同一流动相系统对金银花、茵陈中的绿原酸和槐花中的芦丁
5、同时进行测定,结果较为满意,可用作加强本品的质量控制指标。1仪器与试药仪器:日本岛津LC-10Atvp泵、SPD-10Avp紫外检测仪;深圳威玛通用多媒体数据工作站;SB2200超声清洗器。绿原酸对照品(供含量测定用,批号:200212)、芦丁对照品(供含量测定用,批号:200206),均为中国药品生物制品检定所提供。痔炎消片为广西某药业市售品(规格:0.53g/片,批号:070601,070602,070603)。乙腈、磷酸为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯。32方法与结果2.1色谱条件DiamonsilC18柱(4.6mm×250
6、mm,5μm),流动相:乙腈-0.5%磷酸(20:80),流速:1.0ml/min,检测波长:344nm,进样量:20μl,柱温:室温。在此色谱条件下,对照品和样品色谱图见图1~4。2.2对照品溶液的制备2.2.1绿原酸对照品的制备精密称取绿原酸对照品4.8mg,置20ml棕色瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀;精密量取5ml,置50ml棕色瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含绿原酸0.024mg)。2.2.2芦丁对照品的制备精密称取芦丁对照品12.03mg,置20ml量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀;精密量取10ml,
7、置50ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含芦丁0.1203mg)。2.2.3混合对照品溶液的制备精密量取绿原酸对照品和芦顶对照品各5ml,置同一棕色瓶中,摇匀,即得。2.3供试品溶液的制备取本品5袋内容物,混匀,研细,取0.5g,精密称定,置50ml棕色容量瓶中,加甲醇-水(3:7)的溶液40ml,超声30min使溶解,放冷,加至刻度,摇匀,用微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。2.4空白样品的制备据处方比例,按标准制备法[1]制备不含金银花、茵陈和槐花的痔炎消颗粒,并按“2.3”项下方法同法制成阴性空白对照溶液。2.5
8、线性关系的考察分别精密量取对照品溶液1.0、2.0、5.0、10.0、15.0、25.0ml,分别置25ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,进样测定。以峰面积积分值为纵坐标,进样