奥沙利铂对背根神经节神经元凋亡的影响.pdf

奥沙利铂对背根神经节神经元凋亡的影响.pdf

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1、山东医药2014年第54卷第22期奥沙利铂对背根神经节神经元凋亡的影响苗亚军,王言森,杜向阳,张琼(山东省交通医院,济南250013)摘要:目的观察奥沙利铂(OHP)对体外培养的背根神经节(DRG)神经元的致凋亡作用,并探讨其机制。方法雌性Wistar大鼠雌性20只、雄性5只按4∶1合笼饲养,第2天选取孕鼠,至第12.5天(E12.5)、19.5天(E19.5)时,将所获孕鼠麻醉后取出胚胎,体外培养DRG神经元。将选自E12.5及E19.5的胚胎DRG神经元各分为4组,在E12.5低、中、高剂量组及E12.5对照组培养液中分别加入10、20、50μmol/LOHP及正常细胞

2、培养液;在E19.5低、中、高剂量组及E19.5对照组培养液中分别加入10、20、50μmol/LOHP及正常细胞培养液。各组均作用24h。采用Hoechst33342染色DRG神经元细胞核,计算凋亡细胞所占比例。采用Westernblot法检测凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果E12.5中、高剂量组DRG细胞凋亡比例高于E12.5对照组及E12.5低剂量组(P<0.05)。E12.5中剂量组、E12.5高剂量组Caspase-3蛋白的表达高于E12.5对照组及E12.5低剂量组(P<0.01),而低剂量组与对照组差异无统计学意义。结论OHP可引起体外培养的E12.5D

3、RG神经元的凋亡,可能是通过干预DRG神经元的分化发挥致凋亡作用。关键词:奥沙利铂;背根神经节;神经毒性;凋亡doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2014.22.007中图分类号:R979.1    文献标志码:A文章编号:1002-266X(2014)22-0021-03InfluenceofoxaliplatinonapoptosisofdorsalrootganglionneuronsMIAOYa-jun,WANGYan-sen,DUXiang-yang,ZHANGQiong(ShandongJiaotongHospital,Jinan25001

4、3,China)Abstract:ObjectiveToinvestigateifoxaliplatin(OHP)caninduceapoptosisofdorsalrootganglion(DRG)neu-ronsandthemechanismofOHP-inducedapoptosis.MethodsInthisstudy,wechose20femaleWistarratsand5malerats,rearingfor4∶1infivecages,andselectedthefemaleratswhichhadvaginalplugthenextday.Onembryo

5、nic12.5day(E12.5)andE19.5,thepregnantratswereanesthetizedandthentheirembryoswereremovedtoculturetheDRGneuronsinvitro.TheculturedembryonicDRGneuronsweredividedinto4groupsrespectively:E12.5low,medium,highdosegroupsandE12.5controlgroup,whichwereincubatedwith10,20,50μmol/LOHPandnormalcellcultu

6、refluidfor24hours;E19.5low,medium,highdosegroupsandE19.5controlgroupwhichwereadded10,20,50μmol/LOHPandnormalcellculturefluidfor24hours.WeusedHoechst33342tostainthenucleusofDRGneuronsandcalculatedthepercentageofapoptosiscells.Theexpressionofcaspase-3proteinwasdetectedbyWesternblotting.Resul

7、tsThepercent-ageofapoptosiscellsintheE12.5mediumandhighdosegroupswashigherthanthatofE12.5controlandE12.5lowdosegroups(P<0.05),andtherewasnosignificantdifferencebetweenthelowdosegroupandthecontrolgroup.Theexpres-sionofcaspase-3proteinintheE12.5mediumdosegroupan

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