主要组织相容性复合体基因胸腺转移减轻异种移植排斥反应的实验研究

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1、生旦堕笪型堕垄查生箜!鲞箜期ChinJClinThoracCardiovascSurg，August2010，Vo1．17，N。．4ll基黜爨多菁≯主要组织相容性复合体基因胸腺转移减轻异种移植排斥反应的实验研究张文谦侯生才李彤李辉胡滨肖白许晴。(1，首都医科大学附属北京朝阳医院胸外科，北京100020；2．首都医科大学附属北京朝阳医院基础医学研究中心，北京100020；3．首都医科大学基础医学院生殖医学研究中心，北京100069)摘要：目的探讨主要组织相容性复合体(MHC)基因胸腺转移减轻异种移植排斥反应的可行性。方法通过分子克隆技术，提取、扩增供体小鼠(Balb／c)的H一2K基因(小

2、鼠MHC—I类基因)，构建表达型载体质粒pCI-H一2K。受体选用2O只SD大鼠，采用随机数字表法分为实验组和对照组，每组1o只。采用超声引导下穿刺和脂质体转染的方法，实验组受体胸腺注射pCI-H一2K；对照组受体胸腺注射空pCI—neo载体质粒。两组随即均行小鼠一大鼠耳后心肌移植，观察异种移植排斥反应。结果实验组异种移植心肌的存活时间较对照组明显延长，差异有统计学意义(14．61±2．98dvs．6．40±1．58d，t一一7．619，P<0．05)；移植心肌病理切片显示：对照组有较多淋巴细胞浸润，移植心肌大部分坏死；实验组无淋巴细胞浸润，尚有较多心肌存活；混合淋巴细胞反应：实验组对供

3、体小鼠反应明显低于对照组(一4．758，P一0．ooo)；流式细胞学检测：大鼠胸腺细胞表面表达异种MHC分子，转染效率达6O．7。结论MHC基因胸腺转移可以减轻异种移植排斥反应，为异种移植免疫耐受的实现提供理论和实验依据。关键词：主要组织相容性复合体；胸腺；基因转移；异种移植排斥反应中图分类号：R392．4文献标识码：A文章编号：1007—4848(2010)04～0307—05ExpressionofDonorMajorHistocompatibilityComplexGeneinThymusbyGeneTransfertoMitigateXenograftRejectionZHANG

4、Wen—qian，HOUSheng—cai，LITong，LIHui，HUBin，XIAOBai，XUQing。．(1．DepartmentofThoracicSurgery，BeijingChaoyangHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100020，P．R．China；2．BasicMedicalResearchCenter，BeijingChaoyangHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100020，P．R．China；3．ReproductiveMedicalResearchCente

5、r，CollegeofBasicMedicine，CapitalMedicalUniversity，Beijing100069，P．R．China)C0rres声0igauthor：LHui，Email：huilee@rip．sina．cornAbstract：ObjectiveToassessthefeasibilityoftransferringmajorhistocompatibilitycomplex(MHC)geneintothethymustomitigatexenograftrejection．MethodsBymolecularcloningtechnique，weext

6、ractedandproliferatedtheH2Kgenefromdonormice(MHCclassIgeneofBalb／cmice)andconstructedtheexpressionvectorplasmidofpCI—H一2K．TwentySDratswereselectedasreceptors，andbyusingrandomnumbertable，theyweredividedintotheexperimentalgroupandthecontrolgroupwithequalnumberofratsineachgroup．Byultrasound—guidedpu

7、nctureandlipofectionmethod．thepCI—H一2KwasinjectedintothymusofSDratsintheexperimentalgroupandmeanwhile，emptyvectorplasmidofpCI-neowasinjectedintothymusofSDratsinthecontrolgroup．Subsequently，wetransplantedthedonormicemyo