低分子量硫酸葡聚糖抑制异种移植超急性排斥反应的研究

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1、华中科技大学硕士学位论文低分子量硫酸葡聚糖抑制异种移植超急性排斥反应的研究姓名：徐婧申请学位级别：硕士专业：免疫学（移植免疫）指导教师：陈实20070401华中科技大学硕士学位论文低分子量硫酸葡聚糖抑制异种移植超急性排斥反应的研究中文摘要第一部分低分子量硫酸葡聚糖抑制人补体系统活性的研究目的研究不同浓度分子量为5000的低分子量硫酸葡聚糖（DXS）对人补系统活性的抑制作用。方法根据DXS的浓度不同分为5个实验组，DXS浓度分别为0.1mg/ml,0.5mg/ml,1mg/ml,2mg/ml和4mg/ml，不含DXS组作为对照。CH50法检测含有不同终浓度DXS的人血清

2、的补体活性，MTT比色法测定含不同终浓度DXS的人血清对猪内皮细胞杀伤率，免疫荧光法检测猪内皮细胞表面补体C3和IgM、IgG抗体沉积。结果DXS可以抑制人血清补体活性，抑制人血清对猪内皮细胞的毒性作用，剂量越大，抑制率越高,细胞表面补体C3抗体沉积越少，IgM、IgG抗体沉积没有明显差异。结论低分子量硫酸葡聚糖能有效抑制人补体系统活性关键词硫酸葡聚糖;猪；内皮细胞;补体1华中科技大学硕士学位论文第二部分低分子量硫酸葡聚糖抑制人补体介导的异种移植超急性排斥反应的研究目的研究分子量为5000的低分子量硫酸葡聚糖（DXS）抑制人补体激活而抑制异种抑制超急性排斥反应的发生。

3、方法建立balbc小鼠心脏体外灌注模型，用含DXS终浓度分别为0.1mg/ml(n=8)，2.0mg/ml(n=9)的10％人血清灌注液进行灌注，以不含DXS的人血清组为对照(n=7)，研究低分子量硫酸葡聚糖抑制人补体激活从而抑制人补体介导的超急性排斥反应.结果心脏搏动时间对照组（n=7），0.1mg/ml组(n=7)和2.0mg/ml组（n=7）分别为17±11min，49±15min和123±19min，含DXS组心脏搏动时间明显长于对照组（Dunnett'sT检验，P<0.01）;免疫荧光及免疫酶染色显示2.0mg/ml组心脏内补体C3c,C5b-9沉积较对照组

4、明显减少。结论低分子量硫酸葡聚糖能有效抑制人补体激活从而抑制补体介导的超急性排斥反应发生。关键词硫酸葡聚糖;小鼠;血液体外灌注;补体2华中科技大学硕士学位论文EffectoflowmolecularweightdextransulfateonhyperacuterejectioninxenotransplantationPartⅠLowmolecularweightdextransulfateinhibitshumancomplementactivityObjectiveToinvestigatetheeffectoflow-molecularweightdextra

5、nsulfate(DXS,molecularweight5000)onhumancomplementactivityMethodsCH50testwaschosentotestthecomplementactivityofthepoolednormalhumanB-typeseruminadditionofdifferentconcentrationofDXS(0.1mg/ml,0.5mg/ml,1mg/ml,2mg/ml,4mg/ml).MTTtestwaschosentoevaluatethecytotoxicityofhumanseruminadditionof

6、differentconcentrationofDXSagainstPEC.HumanserumwithoutDXSservedascontrol.ImmunoflurescencestainingwaschosentodetectthedepositionofcomplementC3candanti-humanIgM、IgGantibodiesonthePECsurface.ResultsDXSdose-dependentlyinhibitthehumanserumcomplementactivityandinhibitthecytotoxityofhumanser

7、umagainstPEC.Comparedtothecontrolgroup,complementC3cdepositiononthePECsurfaceweredecreased.Significantdifferencesofanti-humanIgM、IgGantibodiesdepositioncouldnotbedetected.ConclusionLow-molecularweightdextransulfatecouldeffectivelyinhibitthehumancomplementactivity.KeyWordsLow-mo