ptdmfoxp3抑制小鼠皮肤移植排斥反应的研究

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1、PTDmFoxp3抑制小鼠皮肤移植排斥反应的研究作者:舒新军,季宝菊,蔺昕,许逊,田雨香俆三荣,邵启祥【摘要】目的:研究带有蛋白穿膜结构域的小鼠Foxp3融合蛋白(mouseFoxp3fusinproteincombiningwithtransductiondomain,PTDmFoxp3)对小鼠脾淋巴细胞活化增殖能力和皮肤移植排斥反应的影响。方法:取健康C57BL/6小鼠脾淋巴细胞,在体外经刀豆蛋白A(concanavalineA,ConA)活化,并分别给予环孢素A(cyclosporine,CsA)、不同浓度的PTDmFoxp3,mFoxp3,PTDGFP和培养基处理,检测脾

2、淋巴细胞增殖指数。在此基础上进行从Balb/c小鼠到C57BL/6小鼠的皮肤移植试验,将40只C57BL/6受体小鼠随机分为4组,每组10只,分别以PTDmFoxp3,CsA,0.9%氯化钠注射液(NS),PTDGFP于手术当天开始连续腹腔注射8天为干预手段。术后第9天各组随机取2只移植小鼠,采集皮片标本,进行组织学检查。其余的8只用于观察移植皮瓣的存活时间。结果:PTDmFoxp3和CsA相似,与其他处理方法相比明显抑制ConA活化的小鼠脾淋巴细胞增殖指数(P<0.05)。PTDmFoxp3组,CsA组移植物的存活时间较各对照组显著延长(P<0.05);病理检查显示

3、PTDmFoxp3组和CsA组移植物淋巴细胞浸润明显轻于各对照组。结论:PTD12mFoxp3能抑制ConA活化的T淋巴细胞的增殖,且具有抑制小鼠皮肤移植排斥反应的作用。【关键词】小鼠Foxp3融合蛋白;免疫抑制;移植排斥[Abstract]Objective:ToinvestigatethepotentialinhibitingabilitytoactivelymphocytesproliferationandskinallograftrejectionofthefusionproteinofmouseforkheadboxP3combiningwithproteintransdu

4、ctiondomain(PTDmFoxp3)inmice.Methods:Thesinglecellsuspensionoflymphocyteswaspreparedfrommousespleen.PolyclonalactivatorConAwasaddedtoactivethelymphocytes.ThenthesinglecellsuspensionoflymphocyteswasincubatedwithdifferentconcentrationsofPTDmFoxp3,PTDGFP,cyclosporine,andblankcontrolfor48h,respe

5、ctively.ThebioactivityofinhibitinglymphocytesproliferationofeachgroupwasdetectedbyincorporatingofCCK8invitro.AllogeneicfullthicknessgraftsfromBalb/cmiceweretransplantedontothebackofC57BL/6mice.FortyC57BL/6micewererandomlydividedintofourgroups,witheachgrouphaving10miceandreceivingadifferenttreat

6、mentincludingPTDmFoxp3,cyclosporine,0.9%physiologicalsalineinjectionandPTDGFP,respectively.Onthesamedayoftheskintransplantation,thetreatingregentswereinjectedinto12C57BL/6miceabdomenanddidcontinuousinjectionforanother7days.Twomiceofeachgroupwereselectedoutrandomlyforhistologicalobservationtill9

7、thdayafterskintransplantation.Thesurvivaltimeofothermicewereobserved.Results:ThebioactivityofPTDmFoxp3wassimilartocyclosporine,theycouldinhibitcellsproliferationofmouseactivatedlymphocytesefficientlyinvitro(P<0.05,

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