adam9特异性 sirna对肾透明细胞癌786-0细胞 adam9基因表达及体外侵袭能力的影响

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1、JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences)Jan．2014Vo1．49No．1·59·doi：10．3969／j．issn．1671-6825．2014．O1．016ADAM9特异性siRNA对肾透明细胞癌786．0细胞ADAM9基因表达及体外侵袭能力的影响张新恒¨，马曜辉¨，单中杰’#1)新乡医学院研究生处新乡4730032)郑州人民医院泌尿外科郑州450003#iS讯作者，男，1964年12月生，博士，教授，研究方向：尿路疾病，E—mail：shanzhongjie@rip．sina．coin关键词肾透明细

2、胞癌；去整合素金属蛋白酶9；侵袭中图分类号R737．11摘要目的：探讨去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)特异性siRNA对人肾透明细胞癌(RCCC)786—0细胞中AD—AM9基因表达及体外侵袭能力的影响。方法：设计合成ADAM9特异性siRNA。将786．0细胞分4组处理，分别为正常对照组(正常培养786．0细胞)、空脂质体转染组、阴性转染组(转染无义siRNA)和ADAM9siRNA转染组。转染24、48、72h后，采用RT—PCR法检测细胞ADAM9mRNA的表达；转染48h后，采用Westernblot法检测细胞AD—AM9蛋白的表达，并用Trans

3、well法检测细胞侵袭能力。结果：转染24、48、72h后，ADAM9siRNA转染组786—0细胞ADAM9mRNA的表达显著低于其他3组(F=47．945、180．456、60．978，P均<0．001)；转染48h后，ADAM9siR—NA转染组786—0细胞ADAM9蛋白表达显著降低(F=142．816，P<0．001)，穿膜细胞数显著减少(F=45．389，P<0．001)。结论：ADAM9特异性siRNA能够有效沉默786—0细胞中ADAM9的表达并降低其体外侵袭能力。EffectofADAM9targetedsiRNAonADAM9geneex

4、pressionandinva—sioncapacityofrenalclearcellcarcinoma786—0cellsinvitroZHANGXinheng“MAYaohui”SHANZhongjie。’，，)OfficeforGraduateStudents，XinxiangMedicalCollege，Xinxiang4730032)DepartmentofUrology，thePeople'sHospitalofZhengzhouCity，Zhengzhou450003Keywordsrenalclearcellcarcinoma；adisin

5、tegrinandmetaU0protease9；invasionAbstractAim：Toexploretheefectofadisintegrinandmeta1l0protease9(ADAM9)targetedsiRNAonADAM9geneexpressionandinvasioncapacityofrenalclearcellcarcinoma786—0ceils．Methods：ADAM9specificsiRNAwasde—signedandsynthesized．786—0cellsweredividedinto4group：normal

6、culturedgroup．Lipofectamine2000transfectiongroup，unrelatedsequencesiRNA(NCsiRNA)transfectiongroupandADAM9specificsiRNAtransfectiongroup．RT—PCRwasappliedtodetectADAM9mRNAin786—0cellsaftertransfectionfnr24．48．and72h．ADAM9proteinwasdetectedbyWesternblotaftertransfeetionfor48h，andcelli

7、nvasionwasdetectedwithTranswel1．Results：TheexpressionofADAM9mRNAinADAM9specificsiRNAtransfectiongroupaftertransfectionfor24，48，and72hwerelower(F=47．945，检查研究进展[J]．实用儿科临床杂志，2009，24(10)：[10]张玲，李继梅，施慧群．2108名大学新生HBV感染状况792调查分析[J]．吉林大学学报：医学版，2010，36(1)：l3[7]金生．慢性乙型肝炎自然史研究进展[J]．中国实用内[11]张

8、艳敏，孙国清，张郑民，等．河南省艾滋病流行区HIV科