siRNA下调表达HDGF对HepG2细胞增殖能力及ADAM9表达的影响-论文.pdf

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1、·2198·年永庆．等siRNA下调表达HDGF对HepG2细胞增殖能力及ADAM9表达的影响siRNA下调表达HDGF对HepG2细胞增殖能力及ADAM9表达的影响许永庆，戴朝六，卜献民，彭松林，徐锋，贾昌俊，赵阳，赵闯，赵亮EfectsofdownregulationHDGFbysiRNAonproliferationofHepG2cellsandexpressionOfADAM9XuYongqing，DaiChaoliu，BuXianmin，PengSonglin，XuFeng，JiaChangjun，ZhaoYa

2、ng，ZhaoChuang，ZhaoLiangDepartmentofHepatobiliaryandSplenicSurgery，ShengfingHospitalofChinaMedicalUniversity，LiaoningShenyang110004，China．【Abstract】0bjective：TostudytheefectofsiRNAtargetinghepatoma—derivedgr0hfactor(HDGF)onprolif-erationofthehepatomacelllineHepG2a

3、ndexpressionofmetalloprotease9(ADAM9)．Memods：SpecificsiRNAforHDGFgenewasdesignedandsynthesized，followedbytransienttransfeetionintotheHepG2cells．RT—PCRwasusedtoexaminetheexpressionofHDGFandADAM9．TheproliferationoftheHepG2cellswasexaminedbyM1Trassay．Results：Theexpr

4、essionofHDGFandADAM9wasfoundtobesignificantlysuppressedat48hour(decreasedto7％and5％respectively，P<0．05)，andtheproliferationoftheHepG2cellswasalsosuppressedsignificantlyat48hour(P<0．05)．TheexpressionofADAM9waspositivelycorrelatedwiththeexpressionofHDGF，significantl

5、ysup—pressedat48hour．Conclusion：HDGFsiRNAcansignificantlysilencetheexpressionofHDGFandADAM9，inhibittheproliferationabilityoftheHepG2cells．【Keywords】hepatoma—derivedgrohfactor；smallinterferingRNA；HepG2cells；ADAM9；liverneoplasmsModemOncology2013，21(10)：2198—2201【摘要

6、】目的：探讨HDGF基因特异性siRNA对肝癌细胞系HepG2的增殖能力及ADAM9基因表达的影响。方法：设计并合成HDGF基因特异性的siRNA干扰序列，瞬时转染HepG2细胞。实时荧光定量PCR检测HDGF和ADAM9mRNA的表达变化；MTY法观察细胞增殖能力的变化。结果：转染48h时HDGF和ADAM9的基因表达抑制最为明显，分别为阴性对照组表达量的7％和5％(P<0．05)。转染48h时HepG2细胞增殖能力受到明显抑制(P<0．05)。结论：HDGFsiRNA能够显著抑制HDGF和ADAM9基因的表达，降低H

7、epG2细胞的增殖能力。【关键词】旰癌衍生生长因子；siRNA；HepG2细胞；ADAM9；肝肿瘤【中图分类号】R735．7【文献标识码】ADOI：10．3969／j．issn．1672—4992．2013．10．14【文章编号】1672—4992一(2013)10—2198—04肝癌衍生生长因子(hepatoma—derived舯Ⅵthfactor，用siRNA方法抑制HDGF基因的表达，研究HDGF在HepG2HDGF)基因分子量为18．5—19．5kD，是一种阳离子多肽，其肝癌细胞中的作用和对ADAM9表达的影响，

8、进一步探讨结构与bFGF相关，是最早从人肝癌细胞系HuH～7的条件HDGF在肝癌生长、侵袭、转移等过程中可能发挥的作用。培养基中分离得到的一种酸性肝素结合蛋白j。目前研究1材料和方法表明，HDGF在许多正常组织中呈低表达或不表达，而在肝1．1材料癌、肺癌和胃癌等恶性肿瘤中的表达水平显著增高，并且发肝癌细胞株HepG2