sirna沉默p28gank对结肠癌细胞增殖的影响

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1、胃肠病学2013年第18卷第12期siRNA沉默p28GANK对结肠癌细胞增殖的影响蔡炜龙许洪宝汪伟民浙江省湖州市中心医院普外科(313000)背景：研究发现p28GANK表达与结肠癌恶性程度相关，其高表达提示预后不良。然而，p28GANK在结肠癌中的作用尚未完全明确。目的：探讨沉默p28GANK对结肠癌细胞增殖能力的影响。方法：以针对p28GANK基因的慢病毒携带siRNA转染人结肠癌HT29细胞，以蛋白质印迹法检测干扰效果，以MTr法检测细胞增殖，以平板克隆实验检测细胞克隆能力，以流式细胞术检测细胞周期变化。结果：与HT

2、29、Con—HT29细胞相比，Si—HT29细胞中p28GANK蛋白表达水平显著降低；细胞增殖速度显著减缓；细胞克隆数量显著减少；G0／G1期细胞比例显著增多，S期细胞比例显著减少，PI值显著降低(P<0．05)。结论：沉默p28GANK在结肠癌细胞中的表达可抑制细胞增殖能力，使细胞周期阻滞。p28GANK可作为治疗结肠癌的新靶点。关键词p28GANK；RNA，小分子干扰；结肠肿瘤；细胞增殖Efectofp28GANKSilencingontheProliferationofColonCancerCellsCAIWeilo

3、ng，XUHongbao，WANGWeimin．DepartmentofGeneralSurgery，HuzhouCentralHospital，Huzhou，ZhejiangProvince(313000)Background：Studyhasshownthatp28GANKexpressioniscorrelatedwiththedegreeofmalignancyofcoloncanceranditshighexpressionindicatesapoorprognosis．However，theroleofp28GA

4、NKincoloncancerremainsunclear．Aims：Toinvestigatetheeffectofp28GANKsilencingonproliferationofcoloncancercells．Methods：I~ntivirus—mediatedsiRNAtargetingp28GANKwastransfectedintocoloncancercelllineHT29．ThesilencingefectWaSdetectedbyWesternblotting．Cellproliferationwas

5、detectedbyMIT．Thecloningcapabilityofcellwasdetectedbyplatecolonyformationassay．Cellcyclealterationwasdetectedbyflowcytometry．Results：Theexpressionofp28GANK，therateofcellproliferationandthenumberofcellclonesweresignificantlydecreased，andtheproportionofcellinG0／G1pha

6、seWassignificantlyincreasedwhilethatinSphasewassignificantlydecreased，andthePIvaluewassignificantlydecreasedinSi—HT29cellswhencomparedwiththoseinHT29andCon—HT29cells(P<0．05)．Conclusions：Silencingp28GANKcallinhibittheproliferationofcoloncancercellsandblockthecellcyc

7、le．p28GANKmightbeapotentialtargetforcoloncancertherapy．Keywordsp28GANK；RNA，SmallInterfering；ColonicNeoplasms；CellProliferation结肠癌是消化道常见恶性肿瘤之一。全球范interfering，RNAi)现象是一种序列特异性、转录后围内，结肠癌的发病率在恶性肿瘤中位居第三位，基因沉默的过程。在哺乳动物细胞中，小分子干扰严重影响人类健康⋯，其发病机制与年龄、环境、家RNA(smallinterferingRN

8、A，siRNA)可有效诱导族史、结肠疾病史、遗传易感性等因素有关，是一个RNAi现象，从而抑制目的基因表达。本研究应用慢多阶段、涉及多病程改变的逐渐积累的复杂过程。病毒携带siRNA表达载体沉默p28GANK在结肠癌目前结肠癌的治疗以外科手术为主，尚缺乏疗效显细胞株HT29中的表达，探讨p