影响大豆遗传转化主要因素及相关条件优化-论文.pdf

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1、浙江农业学报ActaAgricuhuraeZhejiangensis，2013，25(6)：1183—1188http：／／www．zjnyxb．cn马晓丽，冯小锋，杨清华，等．影响大豆遗传转化主要因素及相关条件优化[J]．浙江农业学报，2013，25(6)：1183—1188．DOI：10．3969／j．issn．1004—1524．2013．06．03影响大豆遗传转化主要因素及相关条件优化马晓丽，冯小锋，杨清华，郁晓敏，朱丹华，(’浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江金华321004；浙江省农业科学院作物与

2、核技术利用研究所，浙江杭州310021；长江大学园艺园林学院，湖北荆州434023)摘要：以浙春3号，华春6号，0428三个大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料，运用农杆菌介导法转化GUS基因，通过对GUS基因瞬时表达率的比较，探讨大豆遗传转化的主要影响因素(基因型、外植体等)，并进一步对遗传转化条件进行优化。结果表明：以胚尖为受体时，3个基因型的GUS基因瞬时表达率都很低，在丛生芽的再生部位没有瞬时表达。以下胚轴为受体时，萌发5d，共培养3d后，浙春3号、华春6号、0428在丛生芽再生部位的GUS瞬时表

3、达率达到最高，分别为43．92％，54．45％，58．47％。而以子叶节为受体时，按照常规方法(萌发5d)，浙春3号、华春6号、0428分别在共培养5，4，4d时，其丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率最高，分别为23．05％，13．79％，4．78％；利用浙春3号对子叶节法的萌发时间进行了进一步的优化，发现萌发时间为3d时在丛生芽再生部位的GUS瞬时表达率、芽诱导率较萌发5d都有较大幅度的提高。关键词：大豆基因型；胚尖；子叶节；下胚轴；GUS瞬时表达率；芽诱导率‘中图分类号：S565．1文献标志码：A文章编号：1

4、004—1524(2013)06．1183-06OptimizationofmainfactorsandrelevantconditionsafectingsoybeanAgrobacterium-media-tedtransformationsystemMAXiao—li一，FENGXiao—feng。，YANGQing—hua，YUXiao—min，ZHUDan—hua，(。CollegeofCh'emistryandLifeSciences，ZhejiangNormalUniversity，Jinhua3

5、21004，China；InstituteofCorpandNuclearTechnologyUtilization，ZhejiangAcademyofAgriculturalSciences，Hangzhou310021，China；CollegeofHorticultureandGarden，YangtzUniversity，Jingzhou434023，China)Abstract：Inthisstudy，weoptimizedmainfactors(genotypes，explants，etc)affe

6、ctingsoybeanAgrobacterium—me—diatedtransformationsystembycomparingGUStransientexpressionratewithembryonictip，cotyledonarynodeandhypocotylofZhechunNo．3．HuachunNo．6and0428．TheresultsshowedGUStransientexpressionrateofthethreesoybeangenotypeswaslowintheembryonic

7、tiptransformationsystemandtuftyshootsshowednoexpression．Usingthehypocotyltransformationsystem，themaximumexpressionrateofZhechunNo．3，HuachunNo．6and0428intuftyshootswas43．92％，54．45％，and58．47％，respectively，after5daysofgerminationand3CO—culturedays．Usingthecotyl

8、edonarynodetransformationsystem(5-daygermination)，theoptimalCO—culturetimeforZhechunN0．3，HuachunNo．6and0428were5，4，and4daysrespectivelyandthemaximumexpressionrateofZhechunNo．3，HuachunNo．6and0428